Detta protokoll beskriver hur man upprätthåller Escherichia coli Long-Term Evolution Experiment (LTEE) genom att utföra sina dagliga överföringar och periodiska frysningar och hur man utför tävlingsanalyser för att mäta konditionsförbättringar i utvecklade bakterier. Dessa procedurer kan fungera som en mall för forskare som startar sina egna mikrobiella evolutionsexperiment.