Este protocolo descreve como manter o Experimento de Evolução de Longo Prazo (LTEE) de Escherichia coli realizando suas transferências diárias e congelamentos periódicos e como conduzir ensaios de competição para medir melhorias de aptidão em bactérias evoluídas. Esses procedimentos podem servir como um modelo para pesquisadores que iniciam seus próprios experimentos de evolução microbiana.