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생화학

Extraction et visualisation d’agrégats protéiques après traitement d’Escherichia coli avec un facteur de stress protéotoxique

JoVE 신문
생화학

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JoVE 신문 생화학

Extraction and Visualization of Protein Aggregates after Treatment of Escherichia coli with a Proteotoxic Stressor

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Extraction et visualisation d’agrégats protéiques après traitement d’Escherichia coli avec un facteur de stress protéotoxique

DOI:

10.3791/62628-v

•

07:59 min

•

June 29, 2021

•

Sadia Sultana, Greg M. Anderson, Kevin Pierre Hoffmann, Jan-Ulrik Dahl

¹School of Biological Sciences,Illinois State University

Chapters

00:05Introduction
00:53Stress Treatment of E. coli Strains MG1655 and CFT073
02:12Collecting Bacterial Cell Samples
02:43Extracting the Insoluble Protein Aggregates
04:19Soluble Protein Sample Preparation
05:30Separation and Visualization of Extracted Protein Aggregates Using SDS-PAGE
06:49Results: Visualization of Protein Aggregates After Treatment of Escherichia coli with a Proteotoxic Stressor
07:32Conclusion

Summary

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Ce protocole décrit l’extraction et la visualisation de protéines agrégées et solubles d’Escherichia coli après traitement avec un antimicrobien protéotoxique. Suivre cette procédure permet une comparaison qualitative de la formation d’agrégats protéiques in vivo dans différentes souches bactériennes et/ou entre les traitements.

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Usage Statistics

Réalisé Conditionnement des protéines dans la membrane externe de vésicules Escherichia coli: Conception, production et purification

Détection de l'activité dépendant du pH de Escherichia coli Chaperone HdeB In vitro et In Vivo</em

Détection et visualisation des complexes protéiques induits par endommagement de l'ADN dans des cultures cellulaires en suspension utilisant l'essai de ligature de proximité

Enrichissement des agrégats de protéine insoluble dans le détergent du cerveau post-mortem humain

Quantification de l’abondance et la recharge des niveaux d’ARN de transfert chez Escherichia coli

Production à grande échelle d’ARN Recombinant sur un échafaudage circulaire utilisant un système dérivé de Viroid chez Escherichia coli

Mutagenèse dirigée pour In Vitro et In Vivo des expériences illustrées avec Interactions ARN chez Escherichia Coli

Caractérisation des agrégats de protéines individuels par nanospectroscopie infrarouge et microscopie de force atomique

Acétylation spécifique de la lysine des histones pour la reconstitution des nucléosomes à l’aide de l’expansion du code génétique chez Escherichia coli