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Chapters
- 00:04Introduction
- 01:11Primary Embryonic Midbrain Culture Plate Preparation
- 01:53Primary E13.5 Embryonic Midbrain Culture Setup
- 04:32Seeding with Pre-Formed Fibrils (PFFs) and Semi-automated Immunofluorescence Imaging
- 06:21High-Content Image Analysis
- 07:42Results: Representative Midbrain Culture Characterization and Analysis
- 09:13Conclusion
Hier, Wir präsentieren ein detailliertes Protokoll zur Untersuchung der neuronalen Synuclein-Akkumulation in primären Maus-Dopamin-Neuronen. Phosphorylierte-Synuclein-Aggregate in Neuronen werden mit vorgebildeten ,-Synuclein-Fibrillen induziert. Die automatisierte Bildgebung von immunfluorest markierten Zellen und die unvoreingenommene Bildanalyse machen dieses robuste Protokoll für das Screening von Medikamenten mit mittlerem bis hohem Durchsatz geeignet, die die Akkumulation von Synuclein hemmen.
