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Étude de l’accumulation préforme induite d’α-synucléine par fibrile dans les neurones dopaminergiques de la souris embryonnaire primaire
JoVE 신문
신경과학
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JoVE 신문 신경과학
Studying Pre-formed Fibril Induced α-Synuclein Accumulation in Primary Embryonic Mouse Midbrain Dopamine Neurons
DOI:

10:03 min

August 16, 2020

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:11Primary Embryonic Midbrain Culture Plate Preparation
  • 01:53Primary E13.5 Embryonic Midbrain Culture Setup
  • 04:32Seeding with Pre-Formed Fibrils (PFFs) and Semi-automated Immunofluorescence Imaging
  • 06:21High-Content Image Analysis
  • 07:42Results: Representative Midbrain Culture Characterization and Analysis
  • 09:13Conclusion

Summary

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Ici, nous présentons un protocole détaillé pour étudier l’accumulation neuronale de α-synucléine dans les neurones primaires de dopamine de souris. Les agrégats α-synucléine phosphorylés dans les neurones sont induits avec des fibrilles préformées d’α-synucléine. L’imagerie automatisée des cellules immunofluorères et l’analyse impartiale de l’image rendent ce protocole robuste adapté au dépistage moyen à élevé des médicaments qui inhibent l’accumulation de synucléine.

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