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Einschaltstige Bereicherung einer TAP-Tagged-Histon-Deacetylase des Filamentous Fungus Aspergillus nidulans für Enzymatische Aktivität Assay
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문 생화학
Single-Step Enrichment of a TAP-Tagged Histone Deacetylase of the Filamentous Fungus Aspergillus nidulans for Enzymatic Activity Assay
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Einschaltstige Bereicherung einer TAP-Tagged-Histon-Deacetylase des Filamentous Fungus Aspergillus nidulans für Enzymatische Aktivität Assay

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09:07 min

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May 01, 2019

DOI:

10.3791/59527-v

DOI:
10.3791/59527-v

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09:07 min
May 01, 2019

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1Division of Molecular Biology, Biocenter,Medical University of Innsbruck, 2Biology Department,Maynooth University, 3Maynooth University Human Health Research Institute

Summary

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Die Histondeaketylasen der Klasse 1 (HDACs) wie RpdA haben als potenzielle Zielscheibe zur Behandlung von Pilzinfektionen an Bedeutung gewonnen. Hier stellen wir ein Protokoll zur spezifischen Anreicherung von TAP-getagenem RpdA in Kombination mit einem HDAC-Aktivitätstest vor, der in vitro Wirksamkeitsprüfung von Histon-Deacetylase-Inhibitoren ermöglicht.

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TAP-taggedHistone DeacetylaseAspergillus NidulansEnzymatic Activity AssayClass 1 Histone DeacetylasesRpdAFungal InfectionsHDAC ComplexesFungal-specific Deacetylase InhibitorsConidiaMyceliaLyophilizationBall MillExtraction Buffer

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Bauer, I., Pidroni, A., Bayram, Ö., Brosch, G., Graessle, S. Single-Step Enrichment of a TAP-Tagged Histone Deacetylase of the Filamentous Fungus Aspergillus nidulans for Enzymatic Activity Assay. J. Vis. Exp. (147), e59527, doi:10.3791/59527 (2019).

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