Vi præsenterer her, en protokol for at optimere CRISPR-Cas9 for at opnå en højere specificitet uden tab af målaktivitet. Vi bruger en styret evolution tilgang kaldet Sniper-skærmen til at finde en mutant Cas9 med de ønskede egenskaber. Sniper-Cas9 er kompatibel med afkortede single-guide RNA'er og levering i et ribonucleoprotein format, velkendte strategier for at opnå højere specificiteter.