This content is Free Access.
استخدام القناصة-Cas9 إلى أدنى حد من آثار خارج الهدف كريسبر-Cas9 دون فقدان النشاط على الهدف عن طريق التطور الموجه
Chapters
- 00:04Title
- 01:45Positive and Negative Screening for Evolving Cas9
- 04:47Delivery of Cas9 as an RNP with Truncated sgRNA
- 06:17RNP Delivery
- 07:27Transfection of Plasmids Encoding Sniper-Cas9 and sgRNA
- 09:01Targeted Deep Sequencing for the Analysis of On-target and Potential Off-target Sites
- 09:29Results: Analysis of Sniper-screen, On-target and Off-target Activities
- 10:37Conclusion
نقدم هنا، وضع بروتوكول لتحسين كريسبر-Cas9 لتحقيق خصوصية أعلى دون فقدان النشاط على الهدف. نحن استخدام نهج تطور موجه تسمى قناص-الشاشة لتجد متحولة Cas9 مع الخصائص المرغوبة. قناص--Cas9 متوافق مع مبتوراً واحد-دليل الكشف والتسليم في شكل ريبونوكليوبروتين، الاستراتيجيات المعروفة لتحقيق خصائص أعلى.
