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면역학 및 감염병학
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Co-imunoprecipitação ensaio para estudar interações funcionais entre receptores e enzimas
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JoVE 신문 면역학 및 감염병학
Co-immunoprecipitation Assay for Studying Functional Interactions Between Receptors and Enzymes

Co-imunoprecipitação ensaio para estudar interações funcionais entre receptores e enzimas

DOI:
10.3791/58433-v

•

09:40 min

•

September 28, 2018

•

, ,
1Pulmonary Department,The Chaim Sheba Medical Center, 2Columbia Center for Translational Immunology, Department of Medicine,Columbia University Medical Center

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:37Transfection of Cells
  • 01:54Promoting Phosphorylation in Transfection Cells
  • 02:40Immunoprecipitation
  • 06:13Phosphatase Activity Assay
  • 07:07SHP2 Western Blot Analysis
  • 08:16Results: Analysis of Co-immunoprecipitation Assay
  • 09:18Conclusion

Summary

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Aqui, apresentamos um protocolo para co-imunoprecipitação e um ensaio de atividade enzimática em grânulo para estudar simultaneamente a contribuição de domínios da proteína específica dos receptores de membrana plasmática ao recrutamento de enzima e atividade enzimática.

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Keywords: Co-immunoprecipitationReceptor-enzyme InteractionCell SignalingProtein DomainsEnzymatic ActivationDMEM293-T CellsTransfectionGFP ExpressionPervanadatePhosphorylationPD-1Lysis BufferProtease InhibitorsSodium OrthovanadateImmunoprecipitation

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