Isolare gli acidi nucleici dal lievito

Uno dei molti vantaggi dell’utilizzo del lievito come sistema modello è che grandi quantità di biomacromolecole, compresi gli acidi nucleici (DNA e RNA), possono essere purificate dalle cellule coltivate.

Questo video affronterà i passaggi necessari per eseguire l’estrazione dell’acido nucleico. Inizieremo delineando brevemente la crescita e la raccolta e la lisi delle cellule di lievito, che sono i primi passi comuni all’isolamento di tutte le biomacromolecole. Successivamente, discuteremo due metodi di purificazione unici per la separazione degli acidi nucleici: legame della colonna e separazione di fase. Inoltre, dimostreremo diversi modi in cui questi metodi vengono applicati in laboratorio, tra cui la preparazione di acidi nucleici per tecniche di biologia molecolare come PCR e southern blotting, quantificazione dell’espressione genica in risposta a stimoli ambientali e purificazione di grandi quantità di proteine ricombinanti.