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에서 단백질의 감독 진화에 대한 돌연변이 유발 및 기능 선택 프로토콜 E. 대장균</em
JoVE 신문
생물학
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JoVE 신문 생물학
Mutagenesis and Functional Selection Protocols for Directed Evolution of Proteins in E. coli
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에서 단백질의 감독 진화에 대한 돌연변이 유발 및 기능 선택 프로토콜 E. 대장균</em

DOI:
10.3791/2505-v

•

09:01 min

•

March 16, 2011

•

, , , ,
1Department of Microbiology & Environmental Toxicology,University of California Santa Cruz – UCSC

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:38Creation of a Mutant Library: Mutagenesis
  • 03:23Creation of a Mutant Library: Readout
  • 04:03Mutant Identification and Characterization: Construction of Gradient
  • 05:06Mutant Identification and Characterization: Stamp Transfer of Bacteria
  • 06:27Mutagenesis and Functional Selection Protocols: Representative Results
  • 08:14Conclusion

Summary

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여기서 우리는 주어진 대상 시퀀스에 대한 임의의 돌연변이 라이브러리를 작성하는 간단한 프로토콜을 보여줍니다. 우리는 대장균의 생체내에서 수행됩니다이 방법은, 새로운 효소 활동을 진화하기 위해 기능 선택과 함께 할 수있는 방법을 보여줍니다.

Tags

MutagenesisFunctional SelectionDirected EvolutionProteinsE. ColiMutant LibrariesColE1 PlasmidDNA Polymerase IMutator StrainSolid MediaMutation FrequencyLabelingPCRCloningSequence Space ExplorationBiochemical Activities

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