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Mutagenesis और कार्यात्मक निर्देशित प्रोटीन में एवोल्यूशन के लिए चयन प्रोटोकॉल ई. कोलाई</em
JoVE 신문
생물학
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JoVE 신문 생물학
Mutagenesis and Functional Selection Protocols for Directed Evolution of Proteins in E. coli
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Mutagenesis और कार्यात्मक निर्देशित प्रोटीन में एवोल्यूशन के लिए चयन प्रोटोकॉल ई. कोलाई</em

DOI:
10.3791/2505-v

•

09:01 min

•

March 16, 2011

•

, , , ,
1Department of Microbiology & Environmental Toxicology,University of California Santa Cruz – UCSC

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:38Creation of a Mutant Library: Mutagenesis
  • 03:23Creation of a Mutant Library: Readout
  • 04:03Mutant Identification and Characterization: Construction of Gradient
  • 05:06Mutant Identification and Characterization: Stamp Transfer of Bacteria
  • 06:27Mutagenesis and Functional Selection Protocols: Representative Results
  • 08:14Conclusion

Summary

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यहाँ हम एक सरल प्रोटोकॉल करने के लिए दिए गए लक्ष्य अनुक्रम के लिए एक यादृच्छिक उत्परिवर्ती पुस्तकालय बनाने प्रदर्शित करता है. हम बताते हैं कि इस पद्धति है, जो vivo में Escherichia कोलाई में किया जाता है कार्यात्मक चयन के साथ मिलकर नई enzymatic गतिविधियों को विकसित किया जा सकता है.

Tags

MutagenesisFunctional SelectionDirected EvolutionProteinsE. ColiMutant LibrariesColE1 PlasmidDNA Polymerase IMutator StrainSolid MediaMutation FrequencyLabelingPCRCloningSequence Space ExplorationBiochemical Activities

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