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Protocoles de sélection mutagenèse et fonctionnelles pour l'évolution dirigée de protéines dans les E. coli</em
JoVE 신문
생물학
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JoVE 신문 생물학
Mutagenesis and Functional Selection Protocols for Directed Evolution of Proteins in E. coli

Protocoles de sélection mutagenèse et fonctionnelles pour l'évolution dirigée de protéines dans les E. coli</em

DOI:

09:01 min

March 16, 2011

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:38Creation of a Mutant Library: Mutagenesis
  • 03:23Creation of a Mutant Library: Readout
  • 04:03Mutant Identification and Characterization: Construction of Gradient
  • 05:06Mutant Identification and Characterization: Stamp Transfer of Bacteria
  • 06:27Mutagenesis and Functional Selection Protocols: Representative Results
  • 08:14Conclusion

Summary

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Ici nous démontrons un protocole simple de créer une bibliothèque aléatoire mutant pour une séquence cible donnée. Nous montrons comment cette méthode, qui est réalisée in vivo chez Escherichia coli, peuvent être couplées avec des sélections fonctionnelles d'évoluer de nouvelles activités enzymatiques.

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