Summary

Титрование по правам Коронавирусы Использование Иммунопероксидазное Пробирной

Published: April 28, 2008
doi:

Summary

В этом видео, мы демонстрируем альтернативный метод для обнаружения и titering от вирусов с помощью ферментативного технику обнаружения антигена известный как иммунопероксидазного анализа. Здесь мы покажем вам, как собирать вирусную образцы, подготовить клетки для тестирования, и, наконец, иммунопероксидазного методом с использованием серийных разведений для определения вирусного титра.

Abstract

Расчет инфекционные вирусные титры представляет базовых и основных экспериментальных подхода для вирусологов. Классическая доска анализы не могут быть использованы для вирусов, которые не наносят существенного цитопатический эффект, который в случае штаммов 229E и OC43 от человека коронавирус (HCoV). Альтернативного анализа косвенных иммунопероксидазного (IPA) является описанное здесь для обнаружения и титрования этих вирусов. Чувствительные клетки инокулируют с серийным логарифмической разведения образцов в 96-луночного планшета. После вирусного роста, вирусные обнаружения АПИ дает инфекционным титром вируса, выраженное в "тканевой культуры инфекционная доза" (TCID50). Это означает разведение вируссодержащих образца при которой половина серии скважин лаборатории содержат репликации вируса. Этот метод является надежным методом для титрования HCoV в биологических образцах (клетки, ткани или жидкости).

Protocol

Полный текст протокола для этого экспериментальный подход доступен в протоколах Springer .

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Play Video

Cite This Article
Lambert, F., Jacomy, H., Marceau, G., J. Talbot, P. Titration of Human Coronaviruses Using an Immunoperoxidase Assay. J. Vis. Exp. (14), e751, doi:10.3791/751 (2008).

View Video