Summary

معايرة Coronaviruses الإنسان باستخدام الفحص Immunoperoxidase

Published: April 28, 2008
doi:

Summary

في هذا الفيديو ، ونظهر وسيلة بديلة للكشف عن الفيروسات وtitering باستخدام تقنية الكشف عن مستضد الأنزيمية المعروفة باسم مقايسة immunoperoxidase. هنا ، فإننا سوف تظهر لك كيفية جمع العينات الخاصة بك الفيروسية ، وإعداد الخلايا لاختبار ، وأخيرا باستخدام مقايسة immunoperoxidase التخفيفات المتسلسلة لتحديد عيار الفيروسية.

Abstract

حساب التتر الفيروسية المعدية يمثل نهجا الأساسية والضرورية لعلم الفيروسات التجريبي. لا يمكن المقايسات اللوحة الكلاسيكية تستعمل لأجل الفيروسات التي لا تسبب آثارا كبيرة الاعتلال الخلوي ، والذي هو الحال بالنسبة للسلالات 229E وOC43 التاجى الإنسان (HCoV). الموصوفة هنا بديلا مقايسة immunoperoxidase غير المباشرة (IPA) للكشف ومعايرة هذه الفيروسات. يتم تلقيح الخلايا عرضة لوغاريتمي مع التخفيفات المتسلسلة لعينات في لوحة 96 – جيدا. بعد النمو الفيروسي ، والكشف عن الفيروسات التي تعطي IPA عيار الفيروسات المعدية ، كما عبر عنها "نسيج الثقافة الجرعة المعدية" (TCID50). ويمثل هذا التخفيف من عينة الفيروس التي تحتوي على نصفها من سلسلة من الآبار تحتوي على مختبر الفيروسات تكرار. هذا الأسلوب هو أسلوب موثوق بها لمعايرة HCoV في العينات البيولوجية (الخلايا أو الأنسجة أو السوائل).

Protocol

بروتوكول النص الكامل لهذا النهج التجريبي هو متاح في البروتوكولات سبرينغر .

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Play Video

Cite This Article
Lambert, F., Jacomy, H., Marceau, G., J. Talbot, P. Titration of Human Coronaviruses Using an Immunoperoxidase Assay. J. Vis. Exp. (14), e751, doi:10.3791/751 (2008).

View Video