大量庞廷出血通过双注射自体血
Summary
我们提出了一个协议，通过双注射自体血液，在老鼠中建立一个巨大的庞然大河出血模型。
Abstract
我们提供一个协议，在老鼠中建立一个巨大的庞然大河出血模型。这项研究使用了重约250克的老鼠。一百微升的自体血从尾静脉中取出，立体有毒地注射到庞斯中。注射过程分为两个步骤：首先，将10μL的血液注射到特定位置，前柱位置（AP）-9.0毫米：横向（拉特） 0 毫米：垂直（垂直）-9.2毫米，然后第二次注射位于AP-9.0毫米的残余血液;拉特 0 毫米;垂直 -9.0 毫米，间隔 20 分钟。平衡束测试、肢体放置测试和修改后的 Voestch 神经分数用于评估神经功能。磁共振成像 （MRI） 用于评估体内出血量。这种模型的症状与大量庞汀出血患者一致。
Introduction
脑内出血占中风患者的五分之一。脑内出血的预后取决于出血的速度、体积和位置。与前脑出血相比，脑干出血具有较高的死亡率和发病率3。大约40%的脑部出血发生在第4个庞氏菌中。庞汀出血的病因学和病理生理学与前脑出血5大出血有很大不同，研究较少。
有两种庞丁出血动物模型。一种是自发出血模型，由注入细菌拼贴酶在庞6，7，8诱发。这种模式的最大优点是出血是自发的。然而，拼贴酶只能诱发少量的庞丁出血。此外，拼贴酶可能会导致大脑的其他伤害。另一种模型是由自体血液的立体定向注射引起的。这种模式的优点是，它很容易掌握与高成功率。从理论上讲，研究人员可以将任何血量注入庞然大雅的任何位置。但是，由于通过针线的回漏，注射量有限。最近，双注法已推广，以减少回漏9。这种方法注射两次自体血，注射间隔为20分钟。双注射法用于诱发轻度 （30 μL） 和中度 （60 μL） 庞廷出血，但不诱发大规模庞然大意出血。在诊所里，大多数预后不佳的庞廷出血患者有大出血（超过10毫升）。
在以前的研究中，我们提供了一个协议，以建立一个庞廷缺血中风模型大鼠10。在这项研究中，我们修改了现有的双注射方法，并提供了一个详细的协议，通过在庞氏两个不同位置的100μL自体血的双重注射，诱导大鼠大量庞然大物出血。
Protocol
Representative Results
Discussion
在本研究中，我们提供了一个协议，以产生一个巨大的庞然大海大鼠模型。该模型可用于研究大庞丁出血的病理生理机理和预后。
在整个实验中，使用了25只老鼠，其中只有一只死亡。对MRI、毛解剖和 HE 染色的验证表明，该方法的死亡率非常低，成功率很高。要建立大规模的庞然大物出血模型，必须解决两个问题，注射的自体血液往往泄漏到亚拉氏体空间，并沿着针道流回?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
本研究由中国国家自然科学基金委员会（81471181和81870933）和广州医科大学（0506308）向叶江开放实验室项目，以及中国国家科学基金会（81701471）和广州市卫生委员会科学项目（20191A011083）向邱先生提供资助，中国国家科学基金会（81501009）向吴先生提供资助。
Materials
| 100ml Saline solution | Guangdong yixiang | 191222201 C1 | Preparing heparin diluent |
| 100μl Microinjector | Shanghai Gaoge | Injection of autologous blood | |
| 1ml Syringe | Jiangsu Zhiyu | 20191014 | Withdraw autologous blood from the tail vein |
| 75% Alcohol | Shandong Lierkang | Disinfection of rat tail | |
| Adhesive tape | Shanghai Jinzhong | Surgicl instruments | |
| Animal anesthesia system | RWD | R510-31S-6 | Inducing and maintaining anesthesia |
| Balance beam | Jiangsu Saiangsi | For neurological deficit scores | |
| Blades | Shanghai Feiying | 74-C | For gross anatomy |
| Bone cement | Shanghai Xinshiji | 20180306 | Surgicl instruments |
| Brain tank | Shenzhen LEIYEA | For gross anatomy | |
| Butorphanol tartrate | Jiangsu Hengrui | For pain management | |
| Electric cranial drill | Nanjing Darwin biotechnology | 20180090018 | Making a burr hole on the skull |
| EP tube | Nantong Surui | Transfer autologous blood | |
| Erythromycin eye cream | Yunnan pharmacy | Eyes protection | |
| HE dye liquor | Solarbio | G1120 | For HE staining |
| Heating pad | Dangerous Jungle | JR01 | Keeping warm |
| Heparin sodium injection | Chengdu Haitong Pharmacal Company | 190701 | Preparing heparin diluent |
| IndoPhors | Guoyao of China | Sterilization | |
| Isoflurane | RWD | 20080701 | Inducing and maintaining anesthesia |
| Light dark box | Jiangsu Saiangsi | For neurological deficit scores | |
| Micro-injection pump | Baoding Leifu | TFD03-01-C | Injection of autologous blood |
| MRI system | Philips | Confirmation of infarction in vivo | |
| Needle holder | Shanghai Jinzhong | J32020 | Surgicl instruments |
| Penicilin | Guoyao of China | Infection Prevention | |
| Q-tips | Jiangxi Songhe | Surgicl instruments | |
| Scalp heedle | Jiangxi Hongda | 20200313 | Withdraw autologous blood from the tail vein |
| Scalpel | Shanghai Kaiyuan | 170902 | Surgicl instruments |
| Shearing scissors | Shanghai Jinzhong | Y00040 | Surgicl instruments |
| Stereotaxic apparatus | RWD | 900-00001-00 | for surgical positioning |
| Surgical towel | Xinxiang Huakangweicai | 20070601 | Surgicl instruments |
| Suture needle | Shanghai Jinzhong | Surgicl instruments | |
| Suture scissors | Shanghai Jinzhong | J25041 | Surgicl instruments |
| Tissue holding forcepts | Shanghai Jinzhong | J31080 | Surgicl instruments |
References
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