Isolamento dei leucociti dal latte materno umano per l'uso in un saggio di fagocitosi cellulare dipendente da anticorpi sui bersagli HIV

Il latte materno umano (BM) è costituito da cellule materne che sono >90% vitali¹. La composizione cellulare è fortemente influenzata dallo stadio di allattamento, dallo stato di salute della madre e del bambino e dalla variazione individuale, che rimane poco compresa^1,2,3^,4. Dato che la BM contiene 10³x 10⁵ leucociti/mL, si può stimare che i neonati allattati al seno ingeriscano 10⁵x 10⁸ leucociti materni al giorno⁵. Vari studi in vivo hanno dimostrato che i leucociti materni forniscono immunità critica al bambino e sono funzionali ben oltre questi siti di ingestione iniziale^{5,6,7,8 ,9,10,11}. Tutte le cellule di derivazione materna ingerite dal neonato hanno il potenziale per svolgere funzioni immunitarie a fianco o per compensare i leucociti del bambino¹².

La trasmissione madre-bambino (MTCT) del virus dell’immunodeficienza umana (HIV) rimane una crisi nei paesi con risorse limitate. Poiché le malattie diarrea e respiratorie sono responsabili di notevoli tassi di mortalità tra i neonati nei paesi con risorse limitate, e queste malattie sono significativamente ridotte dall’allattamento esclusivo al seno, i benefici per le madri infette da HIV l’allattamento al seno superano di gran lunga i rischi^13,14,15. A meno che l’accesso all’acqua pulita e la formula per neonati appropriata non siano affidabili, l’OMS non raccomanda la cessazione dell’allattamento al seno per le madri infette da HIV¹⁶. Circa 100.000 MTCT tramite BM si verificano ogni anno; tuttavia, solo il 15% dei neonati allattati al seno dalle loro madri infette da HIV si infettano, suggerendo un forte effetto protettivo di BM^17,18,19^,20,21. Numerosi fattori probabilmente funzionano in tandem per impedire la trasmissione. È importante sottolineare che gli anticorpi specifici per l’HIV (Abs) in BM sono stati correlati alla riduzione dell’MTCT e/o alla riduzione della morte infantile per infezione da HIV^22,23. Ciò che rimane in gran parte poco chiaro è il contributo della frazione cellulare di BM alle sue qualità antivirali.

Molti Abs facilitano una varietà di attività anti-virali mediate dalla regione “costante” della molecola di immunoglobulina, il frammento cristallizzabile (Fc), attraverso l’interazione con i recettori Fc (FcR) che si trovano praticamente su tutte le cellule immunitarie innate, praticamente tutte si trovano nell’uomo BM²⁴. La fagocitosi cellulare dipendente da anticorpi (ADCP) è stata dimostrata come necessaria per lo sgombero delle infezioni virali ed è stata poco studiata nel caso della prevenzione dell’MTCT dell’HIV^{25,26,27, 28 mi la} più del 24 ^{, 29.}Data la scarsità di conoscenze sul potenziale contributo dell’attività ADCP da parte dei fagociti BM alla prevenzione della MTCT dell’HIV, abbiamo mirato a sviluppare un metodo rigoroso per isolare le cellule dalla BM umana al fine di intraprendere uno studio di ADCP mediato da cellule da BM ottenuto in varie fasi di allattamento.