מאמר זה מציג את שיטת המיקום כירורגי בעכברים של קטטר בקרום הבטן מחובר ליציאת גישה זה ממוקם מאחורי החיה. יתר על כן, זה מסביר את השגרה כריתת כליה 5/6 להידמות המדינה uremic של החולים במחלה.
דיאליזה פריטוניאלית (PD) הוא טיפול החלפת הכליות עקבית על ניהול ושחזור האחורי של נוזל hyperosmotic בתוך חלל הצפק לנקז מטבוליטים רעילים ומים הכליות לא מספיק פונקציונלית אינם מסוגלים לחסל. למרבה הצער, הליך זה מתדרדר של הצפק. נזק לרקמות מפעיל את התפרצות של דלקת לרפא את הפגיעה. אם הפגיעה נמשכת והופך להיות דלקת כרונית, היא עלולה להוביל פיברוזיס, וזו תופעה שכיחה במחלות רבות. PD, דלקת כרונית, פיברוזיס, יחד עם אחרים תהליכים ספציפיים הקשורים אלה, להוביל להידרדרות קיבולת אולטראפילטרציה, מה שאומר את כשל ואת הפסקת עוקבות של הטכניקה. עבודה עם דגימות אנושי מספק מידע על הידרדרות זו אבל מתנות מגבלות טכניות ומוסרי כדי להשיג ביופסיות. מודלים בעלי חיים חיוניים ללמוד הידרדרות זו מאז הם להתגבר על חסרונות אלה.
מודל אינפוזיה העכבר כרונית פותחה בשנת 2008, אשר נהנה מתוך מגוון רחב של עכברים מהונדסים, פותח את האפשרות של הלומדים את המנגנונים המעורבים. מודל זה מעסיקה התקן מותאם אישית עבור עכברים, המורכב קטטר המחובר ליציאת גישה הממוקמים subcutaneously מאחורי החיה. נוהל זה מונע פנצ’רים רציפה של הצפק במהלך ניסויים ארוכי טווח, להפחתת זיהומים ודלקות בשל זריקות. בזכות מודל זה, הצפק נזק הנגרם על ידי חשיפה כרונית של נוזלים PD יש כבר מאופיין, מאופנן. טכניקה זו מאפשרת לעירוי של כמויות גדולות של נוזלים, יכול לשמש לחקר מחלות אחרות אשר נחוצה חיסון של סמים או חומרים אחרים על פני פרקי זמן ארוכים.
מאמר זה מציג את שיטת המיקום כירורגי של הקטטר בעכברים. יתר על כן, זה מסביר את השגרה כריתת כליה 5/6 לחקות את המצב של מחסור של הכליות נוכח החולים במחלה.
תפקוד כליות, מחלת כליות
הכליות הן איברים חיוניים מעורבים הומאוסטזיס, סינון הדם וייצור הורמונים. ישנם תנאים שונים להוביל לכשל כלייתי, תחילתה עוקבות של אורמיה, אשר הוגדרה כקבוצת מהתופעות מערכתית בשל הצטברות פסולת בדם נשמרות עקב הפרעות תפקוד כליה1 יתר על כן, מאז יכולת homeostatic מושפעת גם כאשר קיים כשל כליות, יתר לחץ דם עקב עומס נפח עלולה להתרחש, וזה גם מסוכן כמו זה יכול להוביל ספיקת לב1. כאשר יכולת תפקודית של הכליות הוא פחות מ 10% – 15%, המטופל חייב לעבור לאחת האפשרויות הטיפוליות הבאות: המודיאליזה, דיאליזה פריטוניאלית (PD) או השתלת כליות.
המשטרה היא אופציה מעניינת זה מאפשר לחולים להמשיך טיפול מן הנוחות של הבית שלהם או כמעט בכל מקום, ובכך נמנע הצורך החולים תכופים מבקר ונשאר. הטכניקה המשטרה מבטלת מולקולות רעילים קטנות, המים העודפים שנוצרו על-ידי הגוף2 דרך החדרה נוזלים osmotic (נוזל דיאליזה פריטוניאלית, PDF) לתוך חלל הצפק. החדרה זו יוצרת מעבר הצבע osmotic הכרחי עבור ההחלפה של מומסים בגבול ומים בין נימי הצפק PDF, תהליך המכונה אולטראפילטרציה (UF).
הצפק פגיעה הנגרמת על ידי דיאליזה פריטוניאלית
חלל הצפק מכוסה על ידי קרום (PM) המורכבת של טפט התאים mesothelial נח על מטריצה, המאכלס גם מספר כלי הדם, fibroblasts, מקרופאגים אוכלוסיות תאים אחרים. למרבה הצער, קרום הצפק סובל תמיד כמה שינויים במהלך הטיפול PD, כגון אפופטוזיס ועל אובדן התאים mesothelial, המעבר mesenchymal של mesothelial (MMT) ותאי אנדותל (end-MT), גיוס של תאים דלקתיים ו fibrocytes, שינויים בכלי הדם, אנגיוגנזה, lymphangiogenesis ו/או פיברוזיס3,4,5,6,7,8,9. שינויים אלה אחראים התפתחות UF קיבולת כשל10, שמונע את המשך הטיפול, הדורש כי החולה חייב לקבל טיפול חלופי כדי לשרוד (המודיאליזה או השתלת כליות) . לכן, עבור חולים אלו, זה חיוני כדי לעכב או לשלוט על התפתחות שינויים אלה הצפק.
זה כבר העריכו כי אורמיה לבד עלול לגרום לדלקת11, אבל המקומיים הגורם החשוב ביותר היא PDF bioincompatibility. רוב מסמכי Pdf להשתמש גלוקוז כסוכן osmotic, הגורמת לדלקת. הודות PDF אחסון פעמים של עיקור, גלוקוז סובל תהליך של השפלה, מוצרים חדשים מבית כזאתי מופיעים, יצירת דלקת,12,MMT, אפופטוזיס13יותר. יתר על כן, יש גם האפשרות של פגיעה מכנית עקב השיטה החדרה. כל הגורמים הללו, מתנהג באופן רציף, עשויה ליצור מצב דלקתי מתמיד, חוזרים ונשנים, שמוביל דלקת כרונית, אשר מסיע ממברנה התדרדרות וכשל, באופן סופי, UF. כמה נזק זה יכול להיות מופחת או נמנע הוא עדיין עניין של מחקר.
ניתוח על ההתפתחות של נגעים: מדגימות האנושי מודלים בבעלי חיים
עבודה עם ביופסיות האנושית היא גורם מגביל עקב הקושי בהשגת דגימות רקמה. דגימות אלה ניתן להשיג רק ניתוחים שבוצעו עקב תקלה קטטר או השתלת, בדרך כלל לאחר שנים של טיפול המשטרה. גישה זו שימושית לצורך הניתוח של שינויים פתולוגיים סבל על ידי קרום הצפק נחשף ל- PDF, אך אינה מספיקה כדי ללמוד על התפתחות התהליך. אפשרות אחרת היא לנתח תאים מרוקנת מכל למטעי דיאליזה, אבל זה עדיין לא ניתן לספק תרחיש מלא. מיזוג בשתי הטכניקות אפשרי רק עם מודלים בעלי חיים. המבנה הצפק הוא דומה בקרב יונקים, לכן ישנם דגמים עם מיני בעלי חיים שונים. ישנם כמה מחקרים בהתבסס על כבשים (Rodela. et al. 14 ו- Barrell. et al. 15) ומודלים ארנב16,17 ; עם זאת, חיות קטנות יותר עדיפים כמו הם להקל על הבית, לשמור על, הם גם חסכוני יותר. השימוש של חולדות18,19,20,21,22,23,24 מציע זמן טיפול קצר יותר היה צריך לצפות שינויים מורפו-פונקציונלי. הוא ייצג את מודל שימושי מאוד לחקור נושאים שונים כגון ההשפעה של תרופות anti-fibrotic לדוגמה BMP-7 (עצם morphogenic חלבון-7)25 וראס (מערכת הרנין-אנגיוטנסין-אלדוסטרון) מיקוד26,27 , 28.
עם זאת, המודל מאתר התפתחה מודל אידיאלי עם יתרונות רבים על פני אחרים. היתרון הכי מעניין הוא ששינה האפשרות של שימוש גנטית עכברים ללמוד את הבסיס המולקולרי וסלולריות לנזק הצפק. למעשה, עכברים מועסקים לעיתים קרובות לניתוח של מחלות רבות, שכן ישנם זנים שונים עם רקע גנטי ידועים שונים. יתרונות נוספים כוללים את שטח מופחתת הנדרש עבור דיור, מופחתת עלות הניסויים (בגלל גודל קטן יותר החיה), קלות הטיפול, הזמינות של ריאגנטים, הכמות הגוברת של מידע זמין על זנים שונים של עכברים מאז הם היו חיות הנפוצות ביותר במחקר.
מודל המבוסס על עכברים העסקת התקן מושתל כבר המודל ביותר לאחרונה הוקמה משטרת29,30, הוכח לחקות הצפק בליה הנגרמת החולים במחלה עקב חשיפה מסמכי Pdf. מודל זה שיתפה פעולה כדי להבין את שהתהליכים הפתולוגיים ערבו31,32,33. יתר על כן, זה כבר משמש לאימות טיפולים פוטנציאליים שונים עבור ameliorating זה הידרדרות באמצעות המערכת החיסונית מאפננים, תרופות אנטי דלקתיות, אחרים anti-fibrotic וסוכנים אנטי-אנגיוגנזה, כגון מעכבי COX-2 (cyclooxygenase-2) 34, אגוניסטים PPAR-γ (פראוקסיזום מופעל proliferator קולטן-γ)35, טמוקסיפן36, Paricalcitol (ויטמין D קולטן activator זה שמחליש את התגובה החיסונית)37, Rapamycin38 ו Nebivolol 39.
פיתוח המודל עכבר עם קטטר מושתל
המטרה של מודל זה הוא דומה, ככל האפשר, הטכניקה בשימוש בחולים אנושיים PD, ומאפשר לבצע טיפולים מורחב של משטרת חיות קטנות. עד כה, שלוש טכניקות החדרה של נוזל דיאליזה לתוך הצפק נבדקו בעכברים. הראשון, עיוור לנקב של החזית קיר הבטן, שנוי במחלוקת בשל הסיכונים מרובות זה שכ”ט, כגון נזק הצפק, דימום, והוא, כמו דקירה שבוצעו בצורה עיוורת, מהבטן. השיטה השנייה היא מה שנקרא “פתוח קבוע מערכת”, שבה ההתקן הזרקת הנוזל ממוקמת מחוץ לגוף. ההליך זה הכי דומה לזו שבוצעה ב בני אדם. עם זאת, הוא אינו מאפשר ההתפתחות של ניסויים ארוכי טווח, מכיוון שהוא עלול להגביר את הסיכויים לזיהום, בדרך כלל דורשת השימוש בהרדמה כדי להחדיר PDF, אשר עלולים להפריע התוצאות. השיטה השלישית היא “מערכת סגורה”. עם גישה זו, המכשיר כולו משמש החדרה נוזלים הינו ממוקם בתוך גוף החיה. נוזל מוזרק עם מחט דרך יציאת גישה, אשר ממוקם subcutaneously. הליך זה מפחית את הסיכון של דלקת הצפק, דימום כמו גם את הצורך בהרדמה.
כדי לחקור את ההשפעה של אורמיה ב- PD, מודל מאתר האחרונות היה גם שרד40 בהתבסס על המודל אינפוזיה PDF עם קטטר. מודל זה מביא טכניקה חדשנית לביצוע של כריתת כליה בעכברים, ובכך להקטין את תפקוד הכליות. במאמר הנוכחי, שינוי של פרוטוקול מועסק על ידי. Ferrantelli et al. ב 201540 פותחה. פרוטוקול חדש זה מאפשר השרשה קטטר תוך כריתת כליה, מפחית את אורך הפצע אשר נגרם במהלך הניתוח מקלה על גישה לכליות.
הנתונים שפורסמו הראשון ניתוח PD שינויים באמצעות טכניקה “לסגור את מערכת” בוצעה בשנת 200929 . מערכת זו קרובה כלומר המכשיר כולו ממוקם בתוך הגוף נוזלי מוזרק עם מחט דרך יציאת גישה. הבעיה הטכנית החשוב ביותר במודלים חייתיים לטווח ארוך של עירוי נוזלים דרך קטטר היא המופע של חסימה. אופציות א…
The authors have nothing to disclose.
מחברים תודה Ferrantelli אי ג’י Liappas על תמיכתם הגדרת פרוטוקול כריתת כליה 5/6, ר Sánchez-דיאז ו- P. מרטין על הסיוע עם הערכות חנקן ureic, ו Hevia א. פ Núñez על הסיוע בזהירות עכברים. עבודה זו נתמכה על ידי מענקים SAF2016-80648R “Ministerio דה Economía y Competitividad” / אזורית Fondo Europeo דה Desarrollo (MINECO/פדר) כדי מנואל לופז-קבררה ו- PI 15/00598 מ- Fondo דה Investigaciones Sanitarias (FIS)-פדר קרנות, ל אבלרדו אגילרה.
Minute Mouse Port 4French with retention beads and cross holes | Access technologies | MMP-4S-061108A | |
Posi-Grip Huber point needles 25 ga. X 1/2´´ | Access technologies | PG25-500 | |
High Temperature Cautery Kit | Bovie | 18010-00 | |
Forane | abbVie | 880393.4 HO | |
non absorbable suture 6/0 | Laboratorio Agaró | 6121 | |
Scissors | Fine Science Tools | 14079-10 | |
forceps | Fine Science Tools | 11002-12 | |
clamp | Fine Science Tools | 13002-10 | |
Buprenorphine 0,3 mg/ml | pharmaceutical product | ||
cotton swabs | pharmaceutical product | ||
Dalsy (Ibuprofen) 20mg/mL oral suspension | AbbVie S.R.L. | pharmaceutical product |