下腔静脉狭窄: 深静脉血栓形成的小鼠模型

所有动物程序均经动物福利伦理审查机构和英国内政部批准 (英国, 项目许可 40/3745)。小鼠在 C57BL/6 背景, 8-12 星期老, 19-25 g 身体重量, 两个性别使用。 1. 动物麻醉 将一只老鼠放入感应室, 并由5% 异氟醚与100% 氧气混合诱导麻醉。使用流量为0.5 升/分. 等待, 直到鼠标完全停止移动, 其呼吸频率变得罕见。 将鼠标从腔室中取出, 用电动剪刀刮掉腹部。尽可能彻底地去除腹部的毛发, 避免腹腔的污染。 将鼠标置于仰卧位, 并将鼠标的鼻子放入与麻醉系统相连的圆锥中。将异氟醚的百分比降低到 2-3% (确切的百分比可能与动物略有不同)。确保动物睡觉时的呼吸速率比平时低, 但要避免喘气。如果发生喘息, 将异氟醚的百分比降低0.5%。 检查踏板反射, 以确认正确的麻醉和开始手术, 只有当它是阴性的。将兽医软膏涂抹在眼睛上以防止干燥。 将 anti-bactericidal 溶液 (1% 必) 涂抹在老鼠的腹部上, 用不育的棉花芽以某种方式擦拭该区域, 不包括手术部位的电位污染 (例如, 以圆形方式内而外)。重复3次。 2. 下腔静脉狭窄和小鼠恢复的应用 注: 所有的仪器以及材料 (棉花芽, 纱布, 生理盐水等) 与手术区域接触必须是无菌的。操作者必须在手术前擦洗, 并在操作过程中佩戴无菌手套和礼服。显微镜手柄应用无菌箔包裹。 在手术前和整个实验期间给予小鼠反的治疗。例如, 使用丁丙诺啡0.1 毫克/千克皮下30分钟手术前, 然后每12小时, 直到动物被安乐死。由于这种方法的血栓形成类似于无菌炎症, 避免使用抗炎药物作为前。 用不育的褶皱盖住老鼠, 在褶皱处做个洞, 露出手术部位。使用剪刀, 沿腹中线, 1.5 厘米从胸骨下切开切口。使用棉花芽取出的肠道到 left-hand 一侧的鼠标和覆盖他们的无菌纱布浸泡在温暖 (37 ° c) 盐水, 以避免干燥。 从下腔静脉与左肾静脉融合的位置, 确定下腔静脉及其侧支 (可能有0、1或 2) 在尾端方向。结扎所有可见的侧分支具7-0 惰性普理灵缝合尽可能接近下腔静脉。 试着不要直接用钳子夹住旁边的树枝, 而要把它们用钳子握在手里, 一手把它们围起来, 然后用钳子在树枝下做一条地道。不要关闭后面的分支。 用钳子夹住周围的组织, 拉下下腔, 在下腔和主动脉之间的小面积上产生张力, 在下腔静脉与左肾静脉之间的夹角为确切。考虑到几乎不可能将主动脉与下腔静脉分离, 甚至低于2-3 毫米 (在尾部方向)。 在你的右手上用钳子尖端的发散动作在主动脉和下腔之间制造一个洞。记住, 运动越多, 破坏船只的几率就越大。理想情况下, 尽量减少运动次数到3-5。 准备一块7-0 的惰性普理灵缝合约2厘米长。把它放在老鼠的腹腔内, 在操作者的 left-hand 一侧的附近的下腔。 把下腔拉上来再离开在主动脉和下腔静脉之间的孔中插入你的正确的钳子贴士, 这样提示就会出现在下腔静脉的另一侧。进行缝合并将其拉回孔 (图 3A)。 用缝线做一个临时结, 但不要把它关上。将30G 针 (“间隔”) 弯曲为挂钩, 并立即将其关闭 (图 3B)。 卸下分隔符 (图 3C)。 用棉花芽将肠回到腹膜腔, 并均匀地分布在腹腔内。 闭合腹膜与6-0 乔缝合使用连续的循环。关闭第一个和最后一个循环作为一个结。 用金属钉缝合皮肤。 用0.5 毫升温热 (37 ° c) 的葡萄糖盐水皮下注射鼠标以恢复机体的液体平衡。 将鼠标放入一个温暖的 (25 ° c) 房间或室内的单个笼子里, 把食物和凝胶水放进笼子里。观察直到鼠标完全恢复 (一般, 大约1小时)。