L'exposition du porc du système nerveux central pour l'analyse anatomopathologique: Un manuel pour Décapitation, Crâne d'ouverture et cerveau suppression
Summary
Le but de cet article et vidéo d'instruction est de décrire comment exposer et enlever le cerveau de porc post-mortem et hypophyse dans un état intact, adapté à l'analyse macroscopique et histologique.
Abstract
Les porcs sont devenus de plus en plus populaire dans la recherche en neurosciences translationnelle grand animal comme sur le plan économique et sur le plan éthique substitut possible aux primates non humains. La grande taille du cerveau du porc permet l'utilisation des imageurs du cerveau clinique classique et l'utilisation directe et le contrôle des procédures et de l'équipement neurochirurgicales de la clinique humaine. Une analyse plus poussée macroscopique et histologique, cependant, exige une exposition post-mortem du système nerveux central de porc (CNS) et l'élimination ultérieure du cerveau. Ce n'est pas une tâche facile, comme le porc du système nerveux central est encapsulé par un crâne épais, osseux et de la colonne vertébrale. Le but de cet article et vidéo d'instruction est de décrire comment exposer et enlever le cerveau de porc post-mortem et l'hypophyse dans un état intact, adapté à l'analyse macroscopique et histologique.
Introduction
Des études en neurosciences translationnelles chez les porcs sont devenus de plus en plus populaires au cours des deux dernières décennies. La grande taille du cerveau de porc permet l'utilisation d'imageurs du cerveau clinique classiques et l'utilisation directe et les tests des procédures neurochirurgicales et de l' équipement de la clinique humaine 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8. Au cours des 20 dernières années, les porcs, en particulier miniporcs (par exemple, Göttingen minipig), ont été utilisées pour examiner les modalités de traitement neuromodulateurs, comme la transplantation de cellules souches; transfection de vecteur viral; et la stimulation cérébrale profonde dirigée vers la maladie de Parkinson, l' obésité, la dépression, la maladie d' Alzheimer et 2, 6,= "xref"> 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17. Cela a été suivi par le développement d'approches chirurgicales stéréotaxiques et de manipuler le système nerveux central minipig 3, 18, 19, 20, 21. Les modifications du SNC instituées ont été évaluées chez des animaux vivants en utilisant l' imagerie du cerveau (PET 10, 13, 22, 24 et 23 MR), cystometry 11, 12, 25, analyse de la marche17, l' évaluation neurologique 9, 17, et examen post – mortem sur la base de l' histologie et analyse stéréologique 14, 15, 17, 26, 27, 31. Cependant, l'analyse post-mortem nécessite l'exposition et l'élimination du cerveau de porc, ce qui est pas une tâche facile, comme un crâne épais, osseux et un dural fibreux couvrant entourent le cerveau de porc.
Le but de cet article et vidéo d'instruction est de décrire comment le cerveau de porc post-mortem et hypophyse peuvent être exposés et éliminés dans un état intact 15-20 min à l'aide des outils chirurgicaux non motorisés. La vidéo pédagogique et illustrations photographiques montrent miniporcs mâles (âge: 6 mois, poids vif: 20-25 kg) utilisés pour une étude anatomique sur l'hypophyse minipig.
Protocol
Representative Results
Discussion
La plupart des études de neuroscience expérimentales sont réalisées en petites espèces d'animaux, comme les souris et les rats, où l'accès au SNC est facilitée par une fine épaisseur dural et skull-. Cependant, chez les animaux expérimentaux plus grands comme les porcs 1, 4, 8, les moutons 32 et les primates non humains, l'épaisseur considérable de ces structures nécessite l'…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Les auteurs reconnaissent avec gratitude l'aide habile de Mme Trine W. Mikkelsen, Mme Lise M. Fitting, et le personnel Påskehøjgaard. Le Conseil de recherches médicales du Danemark, la Fondation Lundbeck et la Novo Nordisk Fondation a soutenu financièrement l'étude.
Materials
| Heavy Scalpel Handle #4 | FST (Fine Science Tools) | 10008-13 | Good for skin incision and soft tissue removal |
| Non-Sterile Scalpel Blades #23 | FST | 10023-00 | |
| Scalpel Handle #7 | FST | 10007-12 | Optimal for dural incision and precision work |
| Non-Sterile Scalpel Blades #11 | FST | 10011-00 | |
| Surgical Forceps | FST | 11024-18 | The tip of the surgical forceps ensure a firm grip |
| Kerrison Bone Punch | Aesculap Neurosurgery | FF713R | Must be robust, bite size 3-5 mm |
| Bone Rongeur | Aesculap Neurosurgery | MD615 | Must be robust, bite size 15 x 5 mm |
| Bone Rongeur | Aesculap Neurosurgery | FO551R | Must be robust, bite size 25 x 15 mm |
| Bone Chisel | Lawton | 67-0335 | The size of the chisel head should not exceed 20 mm |
| Mallet (Hammer) | Millarco | 5624108 | Weigth 300 g, length 30 cm, head hit area size 2 x 2 cm |
| Micro-Scissor | FST | 14002-14 | |
| Dissector | Aesculap Neurosurgery | OL165R | |
| Göttingen minipigs | Ellegaard Göttingen Minipigs A/S, Denmark | ||
| Euthanimal | pentobarbital | ||
| Ketamine | Pfizer | ||
| Midazolam | Hameln Pharmaceuticals |
References
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