Valutare l'effetto delle sostanze chimiche ambientali su Honey Bee sviluppo dall'individuo alla colonia Livello
Summary
Qui vi presentiamo un metodo per alimentare antiparassitario alimenti contaminati sia un individuo ape e una colonia alveare. La procedura valuta l'effetto dei pesticidi sulle singole api mellifere in vivo l'alimentazione della dieta larvale di base e anche la condizione naturale della colonia dell'alveare.
Abstract
The presence of pesticides in the beekeeping environment is one of the most serious problems that impacts the life of a honey bee. Pesticides can be brought back to the beehive after the bees have foraged on flowers that have been sprayed with pesticides. Pesticide contaminated food can be exchanged between workers which then feed larvae and therefore can potentially affect the development of honey bees. Thus, residual pesticides in the environment can become a chronic damaging factor to honey bee populations and gradually lead to colony collapse. In the presented protocol, honey bee feeding methods are described and applied to either an individual honey bee or to a colony. Here, the insect growth regulator (IGR) pyriproxyfen (PPN), which is widely used to control pest insects and is harmful to the development of honey bee larvae and pupae, is used as the pesticide. The presenting procedure can be applied to other potentially harmful chemicals or honeybee pathogens for further studies.
Introduction
La presenza di pesticidi nell'ambiente è uno dei problemi più gravi che l'impatto della vita di un'ape 1, 2, 3. Diversi studi hanno dimostrato la presenza di residui di pesticidi comuni in colonie di api mellifere e prodotti delle api. A Taiwan, l'applicazione di pesticidi media era 11-12 kg / ha ogni anno (2005-2013). La quantità di pesticidi utilizzati a Taiwan è superiore a quella dei paesi dell'UE, ei paesi dell'America Latina 4, 5. In altre parole, l'ambiente all'apicoltura sta soffrendo gravi sollecitazioni di pesticidi, soprattutto a Taiwan e forse anche in altri paesi.
Il miele ape mellifera è uno dei principali impollinatori nei sistemi agricoli 6 e produce anche prodotti pregiati come miele. Tuttavia, le api sono manifestazioniEd a vari pesticidi e questi pesticidi può essere riportato al alveari dopo foraggiamento sui fiori che sono stati spruzzati con pesticidi quando si raccolgono nettare e polline 7, 8. Essi inoltre possono essere esposti ai pesticidi dagli apicoltori stessi che mirano a controllare i problemi dei parassiti all'interno delle arnie 9, 10, 11. Perché il miele delle api larve sono alimentati da api nutrici per il loro sviluppo, le larve, droni e perfino la regina può essere esposto a questi nettari pesticidi contaminati e polline 12. La tossicità dei vari pesticidi per le api deve essere affrontato 13.
Molti sforzi sono stati fatti per valutare le emissioni di residui di pesticidi ambientali. Yang et al. testato l'influenza del imidacloprid insetticidi neurotossici sullo sviluppo di miele delle api larve nelalveare e ha riferito che una dose sub-letali di imidacloprid ha provocato un comportamento associativo olfattiva delle api adulte 14. Inoltre, Urlacher et al. ha esaminato gli effetti sub-letali di una pesticidi organofosfati, clorpirifos, sulle prestazioni di apprendimento un miele di ape operaia in condizioni di laboratorio 15. Nel nostro studio precedente, abbiamo valutato l'impatto di un regolatore di crescita degli insetti (IGR), piriprossifen (PPN), su api da miele larvali 16.
In questo documento, presentiamo metodi per valutare gli effetti chimici sullo sviluppo delle api. Miele metodi di alimentazione ape sono stati descritti ed applicati sia singole api mellifere o ad una colonia. In un primo momento, abbiamo provato diverse concentrazioni di pesticidi contaminato dieta larvale di base (BLD) di larve nelle colonie per valutare l'impatto del pesticida sulle singole api mellifere in vivo. Si è quindi proceduto a simulare la Condit naturaliioni del pesticida utilizzando lo sciroppo di pesticidi contaminati all'interno di alveari. In questo metodo, PPN, che è ampiamente usato contro insetti parassiti 17 ed è dannoso per lo sviluppo di miele api larve e pupe 16, 18, 19, sarà un indicatore per rappresentare l'effetto negativo del pesticida nel campo.
Protocol
Representative Results
Discussion
Il metodo di deposizione delle uova queen-limitata e il metodo queen-scambio sono passaggi critici per la creazione di gruppi di api per le prove sul campo all'interno di questo protocollo. Il metodo regina limitata ovodeposizione permette la sincronizzazione del ciclo di vita delle api. Di conseguenza, i ricercatori possono selezionare 1 giorno-vecchio larve della stessa età per il trattamento con diverse dosi di pesticidi. Per il metodo francese, lo scambio, la regina è stato scambiato tra la parte A (4 fotogram…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Questa ricerca è stata sostenuta da Grant 105AS-13.2.3-BQ-B1 dal Bureau of animali e piante di ispezione sanitaria e la quarantena, il Consiglio per l'Agricoltura, Executive Yuan e Grant 103-2313-B-197-002-MY3 dal Ministero della Scienza e della Tecnologia (MOST).
Materials
| Honey bee box | SAN-YI Honey Factory | W1266 | Honeybees rearing |
| Queen excluder (between frames) | SAN-YI Honey Factory | I1575 | Queen limitation |
| Queen excluder (on top ) | SAN-YI Honey Factory | I1566 | Queen limitation on top |
| Bee brush | SAN-YI Honey Factory, Taiwan | W1414 | clean the bees on frame gently |
| Bee feeder | SAN-YI Honey Factory, Taiwan | P0219 | feed sugar syrup to colony |
| Transparent slide | Wan-Shih-Chei, Taiwan (http://www.mbsc.com.tw/a01goods.asp?s_id=40) | 1139 | Mark the larval area on the frames (Material: Polyethylene Terephthalate, PET) (Size= Length*Width*thick= 29.7mm*21mm*0.1mm) |
| 24 well tissu culture plate | Guangzhou Jet Bio-Filtration Co., Ltd | TCP011024 | Rearing pupae from extraction |
| Autoclave | Tomin medical equipmenco., LTD. | TM-321 | Make sterilized distilled deionized water (ddH2O) |
| P20 pipetman | Gilson | F123600 | Add PPN into bee larval food pool |
| Incubator | Yihder Co., Ltd. | LE-550RD | Rearing pupae from extraction |
| Kimwipes | COW LUNG INSTRUMENT CO., LTD | KCS34155 | Rearing pupae from extraction |
| Royal jelly | National Ilan University (NIU) | NIU | Make basic larval diet (BLD) |
| D-(+)-Glucose | Sigma | G8270 | Make basic larval diet (BLD) |
| D-(-)-Fructose | Sigma | F0127 | Make basic larval diet (BLD) |
| Yeast extract | CONDA, pronadisa | 1702 | Make basic larval diet (BLD) |
| Sucrose | Taiwan sugar coporation | E01071010 | Make sugar syrup for bee food |
| Pyriproxyfen (11%) | LIH-NUNG CHEMICAL CO.. LTD. | Registration No. 1937 | Insect growth regulator (IGR) used in the experiment |
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