A method for establishing lung infections in immunocompetent rodents is described. With proficiency, this method can be performed quickly and easily to induce stable infection with many isolates of S. pneumoniae, H. influenzae, P. aeruginosa, K. pneumoniae and A. baumannii.
Aday anti bakteriyel tedavilerin etkinliği tercihan amaçlanan klinik endikasyon taklit modellerinde, keşfi ve geliştirilmesi sürecinin bir parçası olarak enfekte olmuş hayvan modellerinde gösterilmelidir. Imünokompetan sıçanlarda ve farelerde güçlü bir akciğer enfeksiyonları indüklemek için bir yöntem olup, S. pneumoniae, H. influenzae, P. aeruginosa, K. pneumoniae veya A. baumannii sebep olduğu ciddi pnömoni modelinde tedavilerin değerlendirilmesine izin veren açıklanmaktadır. Hayvanlar anestetize edilmiştir ve bir agar-bazlı aşı cerrahi olmayan Entübasyon ile akciğer derinliklerine yatırılır. Ortaya çıkan enfeksiyon, tutarlı, tekrarlanabilir ve en az 48 saat süreyle stabil ve çoğu izolatları için 96 saat kadardır. Pazarlanan antibakteriyel yapılan çalışmalar, in vivo etkinlik ile in vitro duyarlılık iyi bir korelasyon göstermiştir ve farmakokinetik / farmakodinamik hedefler arasında uyum tespitBu model ve klinik olarak kabul edilen hedefler gözlenmiştir. tekniği öğrenme bir başlangıç zaman yatırım olmasına rağmen yeterlilik elde edilir kez, bu hızlı ve verimli yapılabilir. Modelin Faydaları nötropenik ihtiyacının ortadan kaldırılması, artan sağlamlık ve tekrarlanabilirlik, daha patojenleri ve izolatları, bir bağışıklığı konak çalışma tasarım ve zorlu bir enfeksiyon kurulması geliştirilmiş esneklik çalışma yeteneği vardır.
enfeksiyon hayvan modellerinde potansiyel ilaç adayı etkinliğini değerlendiren antibakteriyel ilaç keşfi sürecinin kritik bir unsurdur. In vivo etkinlik çalışmaları için önemli veriler sağlar karar (SAR) yapı-aktivite ilişkileri açıklık gelen, keşif çabaları açıklığı boyunca ve farmakokinetik-farmakodinamik belirlenmesi (FK / FD) üzerinden bileşiklerin özelliklerini kurşun kimyasal serisi optimize etmek ve doz seçimi destekleyen klinik geliştirme ve düzenleyici onayı. Yapılan pek çok hayvan enfeksiyon modelleri, bu amaçlar için, literatürde tarif edilmiştir. En yaygın ve yaygın olarak kullanılan modellerden biri Vogelman ve Craig 3, 4 genişletilmiş sonra Kartal 1, 2 öncülüğünde edildi ve nötropenik fare uyluk enfeksiyonudur. Bu model bakteriyel duyarlılık kesme noktaları belirlenmesi desteklenmesi ve insan doz rehberlik PK / PD hedeflerini sağlamak için paha biçilmez olmuştur. Birçok sınav vardırples bu modelin öngörü yeteneği 4-7 kanıtlanmıştır nerede. Ancak, uyluk enfeksiyon modeli dezavantajlarından biri akciğer enfeksiyonları için doğrudan ilgili olmaması. İnsanlarda enfeksiyon bölgesine hayvan modellerinde enfeksiyonun sitesi uyan daha büyük bir ağırlık artık yoktur; ve bu nedenle, pnömoninin tedavisinde bileşikleri incelemek için, hayvanlara bir akciğer enfeksiyonu modeli kullanmak için idealdir.
Deney hayvanlarında akciğer enfeksiyonları uyarılması için çeşitli yöntemler tarif burun soluma, orofaringeal yoldan aspirasyon aerosol maruz kalma ve cerrahi intratrakeal aşılamadan 8 de dahil olmak üzere anti-bakteriyel etkinlik çalışmaları için kullanılmıştır. Bir çok durumda, hayvanların (özellikle fareler) önce güçlü bir akciğer enfeksiyonu elde etmek için nötropenik hale getirilmelidir. Bu ciddi immün sistemi baskılanmış durumda olmasına rağmen, kemirgenlerde yaşayabilir enfeksiyonları üreten bakteri patojen ve suşları sayısısınırlı. Örneğin, zorluklar 11-13 oluşturabilir, başarıyla pnömoni modelleri 9, 10, ve Streptococcus pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa ve Klebsiella pneumoniae gibi daha öldürücü patojen, Haemophilus influenzae veya Acinetobacter baumannii kurmak zor olabilir.
1991 yılında Smith, enfeksiyon basit bir cerrahi olmayan zor entübasyon yöntemiyle 14 ile ciğerlere doğrudan bakteri aşılamak tarafından kurulmuştur hangi bağışıklığı sütten kesilmiş sıçanlarda bir akciğer enfeksiyonu modeli tarif. Berry ve ark. Daha sonra fareler 15 enfekte yöntemini değiştirdi. Agar-bazlı inokulum kullanılarak bu aşılama tekniği S. pneumoniae, H. influenzae, K. pneumoniae, P. aeruginosa ve A. baumannii hem imünokompetan sıçanlarda ve farelerde güçlü bir akciğer enfeksiyonları neden olur. Çeşitli karşı barındıran da dahil olmak üzere izolatların geniş bir yelpazede, müsaitance belirleyicileri ve diğer aşılama yolları vasıtasıyla uygulanabilir bir enfeksiyon üretmek olmayanlar. Ayrıca, etkinlik, bağışıklığı hayvanlarda belirlenecek ağır bağışıklık yetersizliği olmayan hasta popülasyonları için geleneksel nötropenik fare modeli daha alakalı bir durum sağlar. Birden fazla patojen ve izolatların boyunca bu modelin tutarlılığı ve güvenilirliği antibakteriyel etkinlik çalışmaları için mükemmel bir çözümdür.
Bu enfeksiyon modeli yeniden optimum başarısı için, aşağıdaki ek öneriler dikkate alınmalıdır. Bir çalışmada, önceki kullanım in vivo – 3 kez, yeni izolat ölümcüllüğü 2 pasaj ile arttırılabilir. Dondurulmuş bakteriyel stokları her zaman orijinalinden mümkün olduğunca az geçişleri ile türevi kaynak vivo birincil hazırlanan ve tekrar oluşması göreceli veya çözülmüş stok yeniden önerilmez edilmelidir. log fazı büyüme kültürleri pnömonili hastalarda kurtarıldı son klinik izolat kullanılarak ve / veya hazırlanması da enfeksiyon kurulması artırmak için yardımcı olabilir. Agar (örneğin 2 ml tuzlu su süspansiyonu 8 ml agar eklendi) içine bir beş kat seyreltme yerine kullanılabilir (bakteriyel inokulum geliştirmek için on kat ve aşı hacmi ayarlanabilir hayvanın büyüklüğüne göre olabilir, örneğin 200 uL / hayvan genellikle) 250 g farelere aşılanır. içine tuzlu bakteri süspansiyonu eklemeden önceAgar (yani Adım 2.3 at) bakteriyel yoğunluk tahmin ya da görsel denetim, MacFarland standartları veya optik yoğunluk ölçümleri ile tahmin edilebilir. Her in vivo deneyler yapılması önce izole in vitro büyüme özelliklerine aşina olmak için yararlıdır. büyüme ve işlemedeki Tutarlılık herhangi bir izolat için bakteri yoğunluğunun en doğru yansıtan bir parametredir. Bu tür ortam ve doku homojenleştiriciler alternatif olarak, tarif edilen farklı standart mikrobiyolojik yöntemler, inokulum hazırlanması ve enfekte dokulardan bakteri sayımı için uygun şekilde kullanılabilmektedir.
Oldukça hazırlanması ya da Deneyden bir gün önce, agar eriyik 50 ° C olarak ayarlanmış ayrı bir su banyosu içinde bir gece boyunca depolamak için tavsiye edilir. Bu süreci basitleştirmek ve ağar enfeksiyonu sırasında çok sıcak olan karşı korunmaya yardımcı olur. 41 bir ısı – 42 ° C maintai arasında iyi bir denge eldening kısa süreli bakteri hayatta kalmak için çok sıcak olmadan sıvı halde ağar. besleyici agar Olası bir alternatif olarak, asil agar başarılı bazı deneylerde kullanılmıştır. Agar inokulum biri tüp bütün deney için genellikle yeterlidir (ve tavsiye edilir), ancak birden fazla tüpler hayvanların çok sayıda enfekte için hazırlanmış olabilir (örneğin 60'dan fazla) ya da enfekte süreci uzun 30 daha uzun sürer zaman – 45 dakika ise birden çok aşı borular gerekli olduğu gibi agar her tüpe salin bakteri süspansiyonu ekleyin gerekmektedir. Bu, bakterinin yaşamda kalması ve / veya spor aşılamadan önce yüksek bir sıcaklıkta büyük ölçüde maruz kaldıklarında etkilenecek riskini azaltır. Kullanarak birden aşı tüpleri ek hayvan randomizasyon girişimler gerekebilir dikkat edilmelidir. Mümkün olduğunda, aynı inokulum hazırlanması tüm hayvanları enfekte. Te ile yeterlik mevcut seviyesi deneyler boyutunu uyarlamak için tavsiye edilirchnique.
Yetenekli bir bilim adamı entübe ve en az 30 saniye bir hayvanı aşılamak ve 5 kadar aşılamak olabilir – (ağar inokulum dolu bir şırınga ile yani) toplu iş başına 6 hayvan. tekniği öğrenme olanlar için, hız katılaşmaya başlayacaktır agar kadar önemlidir; Ancak, aşı doğru şekilde yerleştirilmiş daha önemlidir. parti başına 1 veya 2 hayvan başlayın ve teknik daha tanıdık hale geldikçe artar. Hayvanlar entübasyon sırasında nefes almaya devam; 3 dakika – dolayısıyla aşılama için zaman penceresi hayvan yaklaşık 2 olmalıdır izofluran, kurtarır ne kadar çabuk bağlıdır. sürecinde uyandırmak Hayvanlar yeniden anestezi ve ikinci kez denedi, ama o kadar tekrar tekrar yapmak için tavsiye edilmez edilebilir. yeterlik ulaşıldıktan sonra ilk denemede başarılı aşılama hayvanların neredeyse% 100 beklenmektedir. ilk fareler kullanılarak tekniğini öğrenmesi daha kolay olduğunu unutmayın; fareler daha narin ve daha küçük çokls hızla manipüle değilse katılaşmış agar ile tıkanmaya daha yatkındır. Ön ısınma şırıngalar, tüpler ve tuzlu yanı sıra, düşük ayarda bir ısıtma yastığı olarak, bir ılık (sıcak değil) yüzeyinde entübasyon cihazı tutmak gibi, agar katılaşma önlemeye yardımcı olabilir. tekniği öğrenirken, bir koyu renkli boya (örneğin konsantre metilen mavisi gibi) yerine agar bakteri süspansiyonu kullanılarak inokulum doğru yerleştirilmesi uygulama da yararlıdır. hemen boyanın aşılamayı takiben (hayvan anestezi ve ötenazi arasındaki kurtarmak için izin verilmez) hayvan açıklanan prosedür gerçekleştirmek, ama euthanize. boya konulmuş yeri belirlemek ve buna göre teknik ayarlamak için teşrih.
Bu modelde birincil son nokta enfekte akciğerlerden CFU olduğunu. Survival bakteri yükünün iyi bir gösterge değildir ve tavsiye edilen son nokta değildir. Bu predicte gibi grup başına 6 hayvan – etkinlik çalışmaları için, ileri n 5D en az% 90 güç ≥1 günlüğünü grupları arasında 10 CFU farkları saptamak için. Hayvanlar kafes arkadaşları arada kalması, ya da gerçek bir raslantısal hale getirme işlemi takip edilebilir şekilde gruplarda enfekte olabilir. gruplar kafes tarafından atanır ise, gruplar son enfekte sonu çalışmada büyüme kontrolleri ile rastgele sırayla enfekte gerektiğini unutmayın (yani bakteri hayatta kalma onaylamak için / spor yüksek bir sıcaklığa maruz sürenin uzunluğu etkilenmedi su banyosunda). Resim veri sansürleme yöntemleri gerekli olması halinde, ve hiçbiri yanlış aşılanmış çalışmanın başlangıcında (önceki herhangi bir tedavi başlanmadan) açık olan herhangi bir hayvan hemen çıkarılması dışında önerilmektedir. Çalışmanın sonunda önce ötenazi hayvanların örneklenmesi gerekir ve sonuç dışlanma için geçerli bir neden prospektif tespit edilmiştir sürece veri kümesi içinde (enfeksiyon veya tedavi ilgisiz yani bir olay) dahil. İlaç ertelenmiş olabilir affvb bazı örnekler ve tüm in vivo enfeksiyon modeller arasında önemli bir husustur. Bir bileşiğin ötenazi sırasında sık sık yakın verilen uzun bir yarı-ömre sahip olup, bu (bakteriyel numaralandırma işlemi sırasında bakteriler, ex vivo öldürme Seyreltme ve kaplama devam etmek için yeterince yüksek bir konsantrasyonda, doku homojenatı içinde mevcut olabilir gece boyunca inkübasyon sırasında agar plakaları üzerinde numune ya da). Bu, aktive edilmiş mangal kömürü ve / veya homojenleştirmeden önce numuneye ilave edilebilir bakteriyel hücrelere zarar vermeden aktif molekül bozan bir katkı önlemek. Diğer yöntemler (süpernatan içinde kalması gerekir) aktif bileşiğin büyük bir kısmı bertaraf örnekleri santrifüj ve farklı seyreltme kullanılarak ve yeterince olmayan bir inhibitör konsantrasyonu, aktif bileşiğin seyreltilmesi için şemaları kaplama içerir.
I, Şekil 2'de gösterilen örnekler ile, bu model başarılı bir şekilde gösterdiği gibidiğer bir model (örneğin, H. influenzae) yetişmez da dahil olmak üzere geniş bir organizma aralığına sahip kemirgenlerde akciğer enfeksiyonları nduces. Bu enfeksiyonlar deneyler belirli bir izolatın model yetmezliği ve / veya zayıf performans nedeniyle tekrarlanması gerekir olasılığını azaltarak, tutarlı ve tekrarlanabilir. hayvanlar immün yetmezliği olmasına rağmen, hepsi de eğer hızla enfeksiyonu gidermek mümkün değildir. Bu, pek çok izolatlar tekrarlanan enjeksiyonları nötropeni korumak için gerek kalmadan en az 96 saat boyunca geçerli bir enfeksiyon iddia ettiği gibi, çalışma uzunluğu artan esneklik sağlar. Bağışıklığı hayvanlarda antibakteriyel etkinliği okuyan potansiyel yararı, daha önce 21 20 not edilmiştir ve bazı bileşiklerin (örneğin oksazolidinon) için, nötropenik olmayan kemirgenler veri daha doğru olanlar hale nötropeni ile karşılaştırıldığında insan maruziyet hedeflerini tahmin edebilir, o kanıtlar vardır 5. t çok amaçlı yararKarşılaştırma için, kurşun optimizasyon çalışmalarını 16, 17 desteklemek için bu model ile oluşturulan olmuştur yayınlanmış ve yayınlanmamış büyük bir veri toplama 22-24 parçası o modeli Şekil 3 ve 4 ve Tablo 1 ve 2. Bu çalışmalarda gösterilmiştir olan yukarıda açıklandığı gibi, önerilen insan dozunun onayı 19 25-29 ve PK / PD karakterizasyonu 18 için, 30-32 görüntü albüm bu model başlangıçta burun inhalasyon yöntemi ile karşılaştırıldığında yapmak daha karmaşık rejimleri, pek çok faydaları vardır. uygulama ve rutin kullanımı ile teknikler gerçekleştirmek için basit hale gelmelidir.
Bu başlangıçta bakteri yükü genellikle diğer akciğer enfeksiyonu modellerinde hedef daha düşük olduğu bazı çalışmalarda olabileceğini belirtti. Bu durum, özellikle, farelerde agar gerekli seyreltme ve küçük meydan hacmi büyük ölçüde bağlıdır. Bununla birlikte, aynı zamanda not edilmelidirBu bakteri üremesi ilk yük nispeten düşük olduğu hatta tüm olgularda görüldü. Hedef başlangıç bakteri yükü 6 ağır pnömoni 33, insan hastalarda tahmini yoğunluklarına tekabül 10 CFU / akciğer (6.8 günlük ortalama akciğer ağırlığı göre farelerde doku 10 CFU / g olarak 7.3) günlük 6.5. Daha yüksek bir başlangıç yükü ilave bakteriyel inokulum konsantre ya da ek bakteri gelişimini sağlamak için bileşiğin tatbikat başlamasını geciktirdiğini ile elde edilebilir; Ancak, çok fazla zorluk yük artan bağımsız duyarlılık tüm antibakteriyel tedavilere dirençli anormal şiddetli ve akut hastalıkları (en az 24 saat, yani ölümü) sebep olabilir. aşı başlangıçta hayvanın sol akciğer içine tercihen yerleştirilir rağmen, enfeksiyon genellikle her iki akciğerde yayılır. Progresif akciğer hastalığı, diğer organlara bakterilerin yayılması ve nihai morbidite genellikle Observ olduğunuS. pneumoniae, K. pneumoniae ve P. aeruginosa ile Ed. Ilgi, H. influenzae ve A. baumannii enfeksiyonları genellikle daha ihtiva ve nadiren öngörülen bakteriyel aşı olarak ölüme yol.
Bu modelde elde edilen etkinlik sonuçları, in vitro duyarlılık profilleri yanı sıra tanımlanan PK / PD hedefleri ile de korelasyon var. Bakteriyel yük azalma rutin test edilen ajana duyarlı kabul izolatları için gözlenir bu olarak dayanıklı sergi taban 16, 17, 19, 24-29, yukarıda herhangi bir değişiklik ya da bakteri üremesi sırasında. İki kinolon ve bu modeli 32 kullanarak bir makrolid değerlendiren sıçanlarda yapılan çalışmalar için gerekli olan PK / PD hedefi ile, nötropenik farelerde belirlenen hedef ve daha da önemlisi korelasyon başlangıca kıyasla S. pneumoniae 10 azalma 1-log göstermiştir toplum kökenli bakteriyel Pneum klinik hedeflerOnia 6, 7, 34, 35. Gepotidacin, yeni bir mekanizma, antibiyotik, birden fazla S. pneumoniae karşı test ve nötropenik Uyluk modelinde 1-log 10 azaltılması için gerekli olandan olarak akciğer enfeksiyonu modeli 31 içinde 1 log-10 azaltılması için de benzer bir PK / PD hedef gerekli 36 akciğer penetrasyonu dikkate alındı (dosyadaki verileri). Akciğer penetrasyon 37 kabul edildi Benzer şekilde, P. aeruginosa 'ya karşı GSK2251052 farelerde tespit PK / PD hedefleri, 38 staz, 1- ve akciğer modeli 30 ve nötropenik Uyluk enfeksiyon modeli arasında CFU 10 azalma 2-günlük için tutarlı . zayıftı burun aşılama kullanarak nötropenik akciğer enfeksiyonu modeli ile korelasyon; Bununla birlikte, GSK2251052 Bu çalışmada 38 statik bir tepki daha üretmemiştir. Bu 6 günlük ile karşılaştırıldığında 8 günlük 10 CFU / fare oldu yüksek bakteriyel inokulum, atfedilebilir <sub> 10 CFU / nötropenik uyluk 37 ve intratrakeal entübasyon 30 modelleri fare. o öteleme öngörü yeteneği değerlendirmek için mevcut modelleri ve klinik verilerle korelasyon doğrudan karşılaştırma izin verdiği gibi bu verilerin toplanması, kıyaslama için kritik öneme sahiptir. zor entübasyon akciğer enfeksiyonu modeli daha yaygın kullanımı analizlerin bu tür ek veriler sağlayacaktır.
Bu bağışıklığı pnömoni modelinin bazı sınırlamalar vardır. Birincisi, yüksek bakteriyel aşı genellikle çok şiddetli bir enfeksiyon gibi çalışmalar sonuç için gerekli çünkü kendiliğinden direniş ortaya çıkması değerlendirmek için çok uygun değildir. Girişimleri takiben (dosyadaki verileri) önceden varolan toksinler kaldırmak için aşı iyice yıkanması rağmen (en az 24 saat içinde can çekişen olma yani hayvanlar) bakteriyel 7 veya 8 günlük, hızlı morbidite görülmüştür başlangıçta 10 CFU yükünü elde etmek. ODaha büyük kemirgenler kullanarak bu sorunu aşmak mümkün olabilir. Sıçanlar, özellikle de daha ağır sıçanları (> 250 g), daha iyi bir fare ile karşılaştırıldığında daha yüksek inokulum tolere görünmektedir ve çalışmalar bu tür için uygun olabilir. patojen etkileşimlerinde: İkinci bir kısıtlama bir enfeksiyon-arttırıcı olarak agar kullanımı bazı ev sahibi değerlendirilmesi için bir model kullanılarak engel olmasıdır. Hastalığın tam akciğer içinde kurulana kadar agar korumalı bir odak noktası temin ettiğine inanılmaktadır. Oldukça bu sorunu aşabilmesi için agar daha tuzlu suda aşının teslim etmek mümkündür; Bununla birlikte, bu sadece bazı izolatlar enfeksiyonu üretecek unutulmamalıdır. Üçüncüsü, teknik uzman olmak için gerekli bir öğrenme eğrisi vardır. prosedür, özellikle farelerde, hassas olabilir. Yanlışlıkla yemek borusuna metal kanül yerleştirmek kolay ve aşırı güç yemek borusu ya da trakea ya delik yol açabilir. inokulum Dikkatli yerleştirme aynı zamandaGerekli veya hayvanların ya yeterince enfekte kurtarmak ya da olmayabilir. sorunsuz ve doğru, ancak, sabır ve azim ile, bir derece yetkin hale gelebilir ve hızlı bir şekilde teknik gerçekleştirin.
, Nötropeni için şartının kaldırılması sağlamlık ve tekrarlanabilirlik artan araştırmacılar daha patojenleri ve izolatları çalışma izin, deneysel tasarım esnekliği artırmak ve pnömoni için farmakodinamik karakterize etmek zorlu bir enfeksiyon sağlayarak, bu bağışıklığı akciğer enfeksiyonu modeli antibiyotik keşif önemli değer katan topluluk. Ek araştırmacılar tarafından bu modelin artan kullanımı daha yaygın kabul görmesi ve uygun yorumlanması için destekleyici bilgiler sağlamaya devam etmek için gerekli kıyaslama sağlamak yardımcı olacaktır.
The authors have nothing to disclose.
JH kabul ve ilk bize bu modeli öğretmek için akıl hocası, arkadaşı ve eski yöneticisi Valerie Berry teşekkür eder; ve bize temellerini öğretti ve antibakteriyel PK / PD alanına bağlılığımızı ilham Gary WOODNUTT. Tüm yazarlar bizim bilim verdiği destek ve takdir David Payne teşekkür etmek istiyorum. Biz bu yöntemleri, özellikle Pete DeMarsh Rob Straub, Roni Sayfası ve Nerissa Simon kullanılarak oluşturulan verilerin vücuda katkıda in vivo mikrobiyoloji meslektaşları bizim eski kabul etmek istiyorum. Son olarak, bizim teşekkürler özellikle biz talep tüm MİK (Lynn McCloskey, Josh Batı ve Sharon Min) sağlamak için, onların yardım için in vitro mikrobiyoloji meslektaşları gidin; ve uzman tavsiyesi ve desteği (Linda Miller, Nicole Scangarella-Umman ve Deborah Butler) sağlayan klinik mikrobiyoloji ekibi için.
TSA II Trypticase Soy Agar with 5% Sheep Blood | Becton Dickinson and Company | 4321261 | |
Chocolate II Agar | Becton Dickinson and Company | 4321267 | |
BBL Brain Heart Infusion Broth Modified | Becton Dickinson and Company | 299070 | |
BBL Trypticase Soy Broth with 20% Glycerol | Becton Dickinson and Company | 297808 | storage media for frozen stock |
Inoculating loop | Nunc | 251586 | |
0.9% Sodium Chloride, USP | Baxter Healthcare Corporation | NDC 0338-0048-04 | |
Difco Nutrient Agar | Becton Dickinson and Company | 213000 | |
30 ml free standing centrifuge tube with cap | EverGreen Scientific | 222-3530-G80 | |
50 ml Polypropylene Conical Tube 30 x115mm | Falcon, a Corning Brand | 352070 | |
14 ml Polypropylene Round-Bottom Tube 17 x 100mm | Falcon, a Corning Brand | 352059 | |
Guide Tool | Intek Services Ltd | GT01 | custom-made metal cannula for rats |
90' Portex tubing | SAI | POR-080-100 | plastic cannula for rats |
1 ml TB syringe slip tip | Becton Dickinson and Company | 309659 | |
PrecisionGlide Needle 25G x 5/8 | Becton Dickinson and Company | 305122 | |
Animal feeding needle – straight 20×3" 2-1/4 | Popper and Sons, Inc | 7903 | used to create metal cannula for mice |
Intramedic polyethylene tubing | Clay Adams brand – Becton Dickinson and Company | 427401 | plastic cannula for mouse |
75 TN 5.0ul syringe 26s/2"/2 | Hamilton | 87930 | HPLC glass injection syringe |
Pyrex tube, culture 25×150 screwcap with rubber liner | Corning | 9825-25 | to autoclave/store metal cannulae |
70% isopropyl alcohol | Vi-Jon (Swan) | NDC 0869-0810-43 | |
Isoflurane, USP | Piramal Healthcare | NDC 66794-013-10 | |
Stomacher | Seward | Stomacher80 | |
Stomacher 80 classic bags | Seward | BA6040 | |
Assay plate, 96 well, round bottom | Costar, Corning Inc | 3795 | optional, for serial diluting |
Blood Omni Plates | Hardy | #A127 | optional, rectangular blood plates |