Pseudomonas aeruginosa Lesão Pulmonar Induzida Modelo
Summary
We have developed a mouse lung injury model by intra-tracheal injection of bacteria Pseudomonas aeruginosa. This model mimics lung injury during pneumonia and is clinically relevant.
Abstract
A fim de estudar a lesão pulmonar aguda humana e pneumonia, é importante para desenvolver modelos animais para imitar várias características patológicas da doença. Aqui nós desenvolvemos um modelo de lesão pulmonar rato pela injeção intra-traqueal de bactérias Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa ou PA). Utilizando este modelo, fomos capazes de mostrar a inflamação pulmonar na fase inicial da lesão. Além disso, alveolar leakiness barreira epitelial foi observada por análise de lavagem broncoalveolar (BAL); e morte celular alveolar foi observada por ensaio de Tunel usando tecido preparado a partir de pulmões lesionados. Numa fase posterior, após lesão, observou-se proliferação de células necessário para o processo de reparação. A lesão foi resolvida 7 dias a partir do início do P. injecção aeruginosa. Este modelo imita o curso seqüencial de inflamação pulmonar, lesão e reparação durante pneumonia. Este modelo animal clinicamente relevante é adequado para estudar patologia, mecanismo de reparação, fepois lesão pulmonar aguda, e também pode ser utilizado para testar potenciais agentes terapêuticos para esta doença.
Introduction
Os pulmões são expostos a agentes patogénicos ambientais e são susceptíveis a inflamação e lesão 1-3. Durante condições patológicas como pneumonia ou Síndrome da Angústia Respiratória Adulto (SARA), patógenos, bem como fatores inflamatórios liberados por leucócitos induzir lesão e morte das células alveolares 1-3. É importante para o desenvolvimento de modelos animais de lesão pulmonar aguda para facilitar o estudo de lesões da patologia, bem como mecanismo de reparação.
Atualmente, a maioria das pessoas usam hiperóxia e bleomicina rato induzida modelos de lesão pulmonar 4. No entanto, os mecanismos de hiperoxia causado um prejuízo não são o mesmo que a maioria das lesões pulmonares comuns que ocorrem durante a pneumonia ou ARDS 5. Bleomicina lesão aguda induzida é raro em um contexto clínico 4. Aqui nós relatamos um modelo de lesão pulmonar mouse usando a injeção intra-traqueal de P. aeruginosa 6,7. Este modelo é clinicamente relevante, e imita a processes que acontecem após pneumonia 8.
Como um patógeno oportunista, nosocomial de indivíduos imunocomprometidos, P. aeruginosa normalmente infecta o trato pulmonar, urinário, queimaduras, feridas, e também causa outras infecções sanguíneas 6. A bactéria liberta virulência fator exotoxina A, multiplicar e desencadear respostas imunes 6. Administração intra-trachael de P. aeruginosa reflecte a situação em exposição humana para as bactérias que causam a pneumonia e a patologia é provável que seja diferente do modelo de lesão pulmonar induzida por vírus da gripe H1N1 recentemente relatado 9. Desde P. aeruginosa é um agente patogénico oportunista, é relativamente seguro de manusear em comparação com alguns dos agentes patogénicos mais virulentas. Aqui utilizou-se a injecção intra-traqueal para administrar as bactérias porque observou-se que este método introduzido mais bactérias na região distal alvéolos do pulmão em comparação comalguns outros procedimentos, tais como a utilização de um cateter através da boca.
Em comparação com outros modelos de lesão pulmonar aguda, o P. aeruginosa modelo descrito é apropriado para o estudo de lesão pulmonar induzida por bactérias e por inflamação excessiva. Ao contrário de outros modelos animais que utilizam P. aeruginosa a indução da sepse 10,11, aqui vamos usar a injeção intra-traqueal destas bactérias para induzir localizada lesão pulmonar aguda.
Protocol
Representative Results
Discussion
O modelo de lesão pulmonar rato Pseudomonas que descrevemos aqui imita todo o processo de inflamação, lesão pulmonar, reparo e resolução que ocorrem após a lesão pulmonar aguda ou pneumonia. Ele tem vantagens únicas comparando com vários outros modelos de lesão em que é clinicamente relevante e relativamente seguro e fácil de manusear.
O passo crítico no processo é que a solução de injecção de bactérias tem de ser muito lento. Se a injecção for demasiado rápido, os rat…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
This work was supported by National Institutes of Health grants HL105947-01 (YL), HL07829-16 (AM), HL090152 (AM).
Materials
| Name | Company | Catalog number | Comments |
| Anesthetic: Ketamin, xylazine, lidocaine, buprenorphine | pharmaceutical grade | ||
| 27g needle | Fisher | 1482648 | |
| syringe | Fisher | 14823434 | 1 ml |
| scissors | Fine Science tools | ||
| forceps | Fine Science tools | ||
| suture | Fisher | NC0147607 | |
| Eye gauge, glove, gown | |||
| Biosafety Cabinet | |||
| chlorine dioxide based sterilant | Clidox | ||
| sheep blood agar plates | Medex supply | HL-1160 |
References
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