Il trapianto di organi solidi come la pelle, cuore e reni è ormai una procedura standard nella pratica medica in tutto il mondo ^1. Organi trapiantati con successo possono essere rifiutati dalla attivazione del sistema immunitario ricevente, che riconosce i principali antigeni di istocompatibilità del donatore. Pertanto, i pazienti trapiantati necessitano di un trattamento con farmaci immunosoppressori ^2. Il trapianto allogenico pelle nei topi è stata fondata da Medawar e colleghi nel 1955 ed è stato utile per identificare le molecole mirate successivamente descritto come complesso maggiore di istocompatibilità (MHC) di classe I e II. Da allora, il modello di trapianto di pelle è stato costantemente modificato e adattato per studiare il ruolo di sottoinsiemi di cellule T e la rilevanza di prodotti chimici e di intervento biologico nel sopprimere rigetto ^2-4. Pelle dall'orecchio e il tronco sono più difficili da preparare e sono più suscettibili di ipossia e necrosi di coda pelle ^5; tuttavia,la procedura di trapianto è simile. Inoltre il monitoraggio dei trapianti coda-pelle è facile a causa della caratteristica struttura dei capelli della pelle.

Questo articolo fornisce una procedura dettagliata per MHC di classe II trapianto coda della pelle disadattamento che permette lo studio dei diversi aspetti del CD4 ⁺ T cellulo-mediata rigetto e la tolleranza nei topi. La mutazione naturale tre punti nella molecola MHC di classe II IA ^b (chiamato IA ^{BM12) 6-9} è sufficiente per indurre il rigetto di alloinnesti cutanee in topi C57BL / 6 ^8. Il ^BM12 molecola IA attiva le cellule T CD4 ⁺ con vari recettore delle cellule T αβ-(TCR) catene da C57BL / 6 topi, tra cui cellule T Vα2Vβ8-TcR-specifici sono stati identificati al fine di generare un topo transgenico ^TcR-10. Il trasferimento adottivo di cellule Vα2Vβ8-TcR specifiche T è stato utilizzato per creare un modello di rigetto nei C57B immunodeficientiL / 6 Rag2 ^{– / –} topi trapiantati con la pelle IA ^BM12.

Differenze genetiche tra donatore e ricevente impatto l'esito di trapianto di accettazione e di rifiuto. Ci sono diversi tipi di trapianti: autologhi sono trapianti dal singolo destinatario stesso; syngrafts e allotrapianti sono trapianti da individui geneticamente identici e geneticamente imparentati, rispettivamente. L'accettazione di diversi trapianti di organi allogenici è stata dimostrata dagli interventi chimici e biologici nei pazienti e nei modelli murini ^11,3,4. In un approccio di base, anti-CD3 anticorpo trattati C57BL / 6 topi hanno mostrato una sopravvivenza prolungata di IA ^BM12 tail-pelle (dati non pubblicati). L'esaurimento delle CD4 ⁺ e CD8 ⁺ T cellule prima del trapianto in topi riceventi provocato l'accettazione delle MHC di classe I e II innesti non corrispondenti (Rev. in ^12). È interessante notare che il rigetto di innesti di pelle dipende dalla presenza di CD4 ⁺ </sup> Cellule T (Rev. in ^12). In questo modello, il targeting interazioni specifiche tra le diverse cellule immunitarie, bloccando le molecole di costimolazione con anticorpi o soppressione di cellule T regolatorie potrebbe indurre tolleranza (dati non pubblicati). Infatti, il blocco sia CD40 e CD28 ha portato a lungo termine di tolleranza allogenico pelle ^13,14.

Trapianto Tail-pelle è facile da eseguire e facile da controllare rispetto al trapianto di altri organi. Inoltre, trapianti coda-pelle sono facili da preparare e sono meno sensibili a ischemia di altri tessuti cutanei. In contrasto con anestetici iniettati, l'uso di gas anestetico (isofluorano) durante il trapianto accorcia sia la procedura e tempi di recupero destinatario. Arricciamenti del trapianto coda-pelle, che può portare alla guarigione della ferita incompleta e rigetto del trapianto, è impedita dalla applicazione di adesivo tissutale. Inoltre, il modello di trapianto di coda-pelle IA ^BM12 attiva esclusivamente CD4 <sup> + Cellule T sia immunocompetenti e topi immunodeficienti (dello stesso background genetico) facilitare l'interpretazione dei risultati.

Questo protocollo descrive un modello di topo affidabile, riproducibile e facilmente controllato che permette intervento chimico e biologico. Il modello è stato progettato per indagare il rifiuto e la tolleranza induzione di trapianti di coda della pelle.