Transplantation af faste organer såsom hud, hjerte og nyrer er nu en standard procedure i medicinsk praksis på verdensplan ^1. Succesfuld transplanterede organer kan afvises ved aktivering af modtagerens immunsystem, der anerkender de store histokompatibilitetsantigener af donoren. Derfor transplanterede patienter har brug for behandling med immunosuppressive lægemidler ^2. Allogen hud-transplantation i mus blev etableret af Medawar og kolleger i 1955 og var nyttige til at identificere de målrettede molekyler senere beskrevet som hovedhistokompatibilitetskompleks (MHC) klasse I og II. Siden da har hudtransplantation model løbende blevet ændret og tilpasset til at studere den rolle, T-celle delmængder, og relevansen af kemiske og biologiske indgreb i at undertrykke afstødning ^2-4. Hud fra øret og stammen er vanskeligere at forberede og er mere modtagelige for hypoxi og nekrose end hale-hud ^5; imidlertidtransplantation procedure ligner. Desuden er let på grund af den karakteristiske hår tekstur af huden overvågning af hale-hudtransplantater.

Denne artikel giver en detaljeret procedure for MHC klasse II mismatch hale-hud transplantation, der giver mulighed for studiet af forskellige aspekter af CD4 ⁺ T-celle-medieret allotransplantatafvisning og tolerance i mus. Den naturlige trepunktsophæng mutation i MHC-klasse II-molekyle IA ^b (benævnt IA ^{bm12) 6-9} er tilstrækkeligt til at inducere afstødning af hud-allotransplantater i C57BL / 6 mus ^8. IA ^bm12 molekyle aktiverer CD4 ^+-T-celler med forskellige αβ-T-cellereceptoren (TCR) kæder fra C57BL / 6 mus, blandt hvilke blev identificeret Vα2Vβ8-TcR-specifikke T-celler for at generere en TcR-transgen mus ^10. Adoptiv overførsel af Vα2Vβ8-TCR-specifikke T-celler er blevet brugt til at etablere en afvisning model i immunoinsufficiente C57BL / 6 Rag2 ^{– / –} mus transplanteret med IA ^bm12 hud.

Genetiske forskelle mellem donor og modtager påvirke udfaldet af transplantation accept og afvisning. Der findes forskellige typer af transplantationer: autotransplantater er transplantationer fra recipientindividets selv; syngrafts og allotransplantater er transplantationer fra genetisk identiske og genetisk uafhængige individer hhv. Accept af forskellige allogene organtransplantationer er blevet påvist ved kemiske og biologiske indgreb i patienter og musemodeller ^11,3,4. I en grundlæggende fremgangsmåde, anti-CD3-antistof-behandlede C57BL / 6 mus viste forlænget overlevelse IA ^bm12 hale-hud (upublicerede data). Udtømning af CD4 ⁺ og CD8 ⁺ T-celler inden transplantation i recipientmus resulterede i accept af MHC klasse I-og II uoverensstemmende transplantater (Rev. i ^12). Interessant afvisning af hudtransplantater afhænger af tilstedeværelsen af CD4 ⁺ </sup> T-celler (Rev. i ^12). I denne model kan målrette specifikke interaktioner mellem forskellige immunceller ved at blokere samstimulerende molekyler med antistoffer eller undertrykkelse med regulatoriske T-celler inducere tolerance (upublicerede data). Faktisk blokerer både CD40 og CD28 førte til langsigtet hud allotransplantat tolerance ^13,14.

Tail-hudtransplantation er let at udføre og let at kontrollere i forhold til transplantation af andre organer. Desuden er halen-hudtransplantater let at tilberede og er mindre modtagelige for iskæmi end andre hud væv. I modsætning til injicerede anæstetika, anvendelse af narkosegas (isofluoran) under transplantation forkorter både proceduren og modtageren restitutionstid. Curling af halen-hudtransplantation, hvilket kan føre til ufuldstændig sårheling og transplantatafstødning forhindres ved anvendelse af væv klæbemiddel. Desuden IA ^bm12 hale-hud transplantation model udelukkende aktiverer CD4 <sup> + T-celler i både immunkompetente og immunsvækkede mus (af den samme genetiske baggrund) at lette fortolkningen af resultaterne.

Denne protokol beskriver en pålidelig, reproducerbar og nemt overvåges musemodel, der giver mulighed for kemisk og biologisk indgriben. Modellen er beregnet til at undersøge afvisning og tolerance induktion af hale-hudtransplantater.