小鼠异位心脏移植技术

所有动物饲养的无病原体条件下，在根据IACUC批准科罗拉多巴巴拉戴维斯中心动物设施大学和照顾根据美国国立卫生研究院指南。 麻醉深度是由脚趾捏最初并遵守呼吸速率判断，一旦程序已经开始。 1，供心收获注射戊巴比妥（60毫克/公斤的IP）麻醉供体小鼠。 通过4路限制固定鼠标和剪辑皮毛。用酒精擦拭皮肤。 解剖远离皮肤上后，通过使横切口正好逊色于膜片打开腹腔。 切开膈肌后到沿海插入和解除前胸壁前上方暴露心脏。 延伸的完整厚度切开后外侧胸腔在胸部的左侧和右侧。 隔离下腔静脉（IVC）和周围放置IVC松散5-0丝线缝合邻近其插入到右心房。 注入1.0毫升4℃肝素生理盐水（200 U /立方厘米）到下腔静脉，然后结扎血管用5-0丝线缝合和鸿沟。 隔离右上腔静脉（rSVC）以类似的方式，并结扎用5-0丝线缝合和鸿沟。 轻轻摇动心脏对动物的右侧和隔离左上腔静脉（lSVC），结扎用5-0丝线缝合，分化露出左肺动脉。 下湿纱布保护心脏，而胸腺钝解剖远离主肺动脉（PA）和左，右PA分支机构及升主动脉弓。 钝性解剖主动脉弓游离周围组织的。微型剪刀是用来划分主动脉近端右肱动脉头侧， 即应该有心脏和部门之间没有分支点的主动脉。 本节中的主动脉弓形成动脉压脉袋的植入过程。 反映主动脉袖口inferiorly，露出树干的PA和PA的左，右分支。 钝解剖左和右PA分支离周围组织从心脏尽可能远。这允许从周围组织中的PA的躯干的容易清扫。 划分PA作为主干远端越好，刚好接近其分叉。本节中的肺动脉的形成静脉压脉袋的植入过程。 广场周围的心脏和领带的基础5-0丝线缝合。的心脏，然后切成免费在该基地，并置于4℃生理盐水。总收获时间是约。 10-15分钟。 2，心脏植入技术麻醉受体小鼠用戊巴比妥（60毫克/公斤的IP的起始剂量，如需要25毫克/公斤的IP补充剂量）。 剪辑的皮毛和通过4路限制固定鼠标和预习用聚维酮碘和悬垂在一个无菌的方式在皮肤上。 做2厘米的垂直中线腹部切口，进入腹腔。 收回肠优和外在的胸部。请将包裹在无菌湿纱布（无菌生理盐水）整个情况。 下面孤立肾血管腹主动脉和下腔静脉（IVC），并放置主动脉周围4-0棉关系，下腔静脉，然后优越劣于吻合部位。 找出任何腰椎血管内场和结扎与10-0尼龙线。 结棉关系，首先劣质其次是优越的。在这样一些血液被保持在使织脉切开术容易主动脉。 用30号针头形成织脉切开术进入主动脉的管腔。延长切口用细显微剪到大约2毫米的长度。此切口在沿长直线该船只的itudinal轴。 做一个结束捐助主动脉在以下时尚收件人主动脉端侧吻合。放置一个10-0尼龙线缝住在供体主动脉和切口在收件人主动脉和领带的下角。将第二个10-0尼龙对面先在供体和主动脉切口在腹主动脉和领带的优越角落。 使正在运行的缝合线从优去劣于主动脉侧壁和领带对先前放置的住宿针。一定要带的intimas（容器内表面）一起为你缝合。然后缝合在一个正在运行的时装和领带内侧。每一侧的第一个和最后缝应尽可能靠近逗留针越好。然后目标是有3均匀间隔即总共5针这两者之间的针迹。 做一个结束捐助肺动脉收件人IVC以下时尚侧吻合。 PunctURE下腔静脉用30号针头，并延长切口约。 2mm的细显微剪。此切口在沿容器的纵向轴线成一直线。 领带的捐助肺动脉切口的下腔静脉的下角落10-0尼龙。将第二个10-0尼龙对面的第一供体动脉和切口下腔静脉和领带的优越角落。 使肺小动脉及下腔静脉和领带之间的连续缝合线。每一侧的第一个和最后缝应尽可能靠近逗留针越好。然后的目标是有5个均匀分布的制作共7针两针之间。 松开远端4-0棉领带重新建立静脉血流。 一旦静脉吻合术的止血已经观察到近端4-0棉布领带逐渐松动和动脉吻合观察止血。当两个吻合口被认为是安全的，删除C奥多栓从鼠标。 返回肠道腹部。腹壁封闭在用5-0丝线缝合在运行方式两层。 管理一个1.0毫升的静脉团无菌，温暖的生理盐水到腹部为收盘时液体复苏和0.8 ml生理盐水皮下注射手术后。手术时，不需要任何其他支援措施。恢复动物的升温毯。共植入时间约为90-120分钟，适合初学者，45-60分钟，使用经验。管理丁丙诺啡镇痛，0.05毫克/千克，资深大律师，0.1-0.2毫升在程序的开始，每6-12小时72小时后运。 3，嫁接评估每天通过经腹部触诊评估肾功能。 按住鼠标，就好像是被给予腹腔注射。 轻轻地压在腹壁食指的前端，并确定打浆STRength的移植性和规律性。 给触诊质量从4的分数（正常幅度和频率）设​​置为0（非打浆拒绝接枝）。 重要注意事项： 所有仪器进行灭菌，无菌手套戴在整个过程和无菌区被保持。供体和受体手术是通过使用在手术显微镜进行。确保吻合是“干净”。即，将针时背面壁没有被捕获。这将导致一个显著收缩流动在一个失败的移植物，在极端情况下，这将很可能导致以后肢瘫痪。这也是非常重要的，全厚度通过包括血管外膜和缝合针的内膜得以实现。边缘的Evertion也确保有内膜至中膜接触，这有助于密封和吻合口愈合。另一个非常重要的事实或者是，确保在吻合缝合线的张力也是最优的。太松，就会出现不可逆的泄漏，过紧和狭窄流动将导致。如果动脉侧，这将导致移植物灌注不良，如果在静脉侧拥挤心脏将导致。