से अंडे का प्रयोग<em> शिस्टोस्टोमा mansoni</em> के रूप में<em> Vivo में</em> मॉडल पेट का कीड़ा प्रेरित फेफड़ों की सूजन
Summary
शिस्टोस्टोमा mansoni अंडे टी सहायक टाइप 2 (Th2) प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया, परजीवी संक्रमण के लक्षण, अस्थमा और एलर्जी सूजन के शक्तिशाली stimulators हैं. इस प्रोटोकॉल एस का इस्तेमाल mansoni अंडा इंजेक्शन Th2 साइटोकाइन प्रेरित फेफड़ों में सूजन की प्रतिक्रिया, अंडे के आसपास फेफड़ों ग्रेन्युलोमा गठन द्वारा विशेषता, eosinophilia और बृहतभक्षककोशिका वैकल्पिक सक्रियण के लिए एक सीडी 4 उत्पन्न.
Abstract
शिस्टोस्टोमा परजीवी रक्त flukes है कि एक अनुमान के अनुसार 200 मिलियन लोगों को दुनिया भर में 1 को संक्रमित कर रहे हैं. साथ शिस्टोस्टोमा, जिगर और तिल्ली का बढ़ना तंतुमयता सहित गंभीर विकृति, पुराने संक्रमण परजीवी ही दो के बजाय परजीवी अंडे के लिए प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के कारण होता है. परजीवी अंडे एक Th2 प्रतिक्रिया आईएल-4 का उत्पादन आईएल -5, आईएल -13, मैक्रोफेज की वैकल्पिक सक्रियण और इयोस्नोफिल्स की भर्ती द्वारा विशेषता प्रेरित. यहाँ, हम एक परजीवी विशिष्ट फेफड़ों में Th2 साइटोकाइन प्रतिक्रियाओं और लिम्फ नोड्स, फेफड़े granulomas अंडा आसपास के गठन से draining, और airway सूजन की जांच के लिए एक मॉडल के रूप में शिस्टोस्टोमा mansoni अंडे का इंजेक्शन का वर्णन.
Intraperitoneal संवेदीकरण और नसों में चुनौती एस के बाद mansoni अंडे जहां वे फेफड़ों पैरेन्काइमा भीतर फंस रहे हैं फुफ्फुसीय धमनियों के माध्यम से फेफड़ों को ले जाया जाता हैgranulomas द्वारा लिम्फोसाइटों, इयोस्नोफिल्स और वैकल्पिक रूप से सक्रिय 3-6 मैक्रोफेज से बना. ब्रोन्को वायुकोशीय रिक्त स्थान में ग्रेन्युलोमा गठन सूजन के साथ जुड़े, के विस्तार से draining लिम्फ नोड्स और CD4 टी सेल सक्रियण मनाया जा सकता है. प्रोटोकॉल विस्तार के हम संक्रमित यकृत (7 से संशोधित) से अलग शिस्टोस्टोमा mansoni अंडे, सुग्राही और चूहों को चुनौती देने और अंगों (ब्रोन्को वायुकोशीय पानी से धोना (बाल), फेफड़ों और draining लिम्फ नोड्स) के विश्लेषण के लिए ठीक करने के लिए यहाँ. हम भी प्रतिनिधि histologic और immunologic अतिरिक्त immunologic विश्लेषण के लिए डेटा और सुझाव शामिल हैं.
कुल मिलाकर, इस विधि vivo मॉडल में फेफड़ों में पेट का कीड़ा प्रेरित immunologic प्रतिक्रियाओं की जांच करने के लिए है, जो मोटे तौर पर पेट का कीड़ा संक्रमण, fibrotic रोग, एलर्जी सूजन और अस्थमा सहित Th2 भड़काऊ रोगों के अध्ययन के लिए लागू है प्रदान करता है. इस मॉडल की typ का अध्ययन करने के लिए लाभ2 ई फेफड़ों में सूजन एक शक्तिशाली फेफड़ों में Th2 भड़काऊ प्रतिक्रिया के reproducibility और draining लिम्फ नोड्स, अंडा आसपास granulomas के histologic परीक्षा द्वारा सूजन के मूल्यांकन के आसानी, और परजीवी की लंबी अवधि के भंडारण के लिए क्षमता में शामिल अंडे.
Protocol
Discussion
यहाँ, एक मॉडल शिस्टोस्टोमा mansoni अंडे को रोजगार के लिए टाइप 2 फेफड़ों की सूजन प्रेरित वर्णित है. इस मॉडल की विशेषता सुविधाओं शक्तिशाली Th2 प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया, airway सूजन और फेफड़े ग्रेन्युलोमा गठन शाम?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस काम के स्वास्थ्य (NIH) AI091759 और Crohn है और बृहदांत्रशोथ फाउंडेशन अमेरिका के विलियम और Shelby Modell परिवार फाउंडेशन अनुसंधान पुरस्कार (एम.एन. करने के लिए) के राष्ट्रीय संस्थानों द्वारा समर्थित किया गया. Schistosome संक्रमित चूहों NIAID Schistosome संसाधन केंद्र (NIAID अनुबंध N01 A130026) द्वारा आपूर्ति की गई.
Materials
| Reagent | Size/Description | Company | Catalog # |
| Collagenase/Dispase | 500 mg | Roche Applied Science | 11 097 113 001 |
| Diff Quik Hema 3 Stain | Pack | Fisher Scientific Co. LLC | 122-911 |
| DMEM | Liquid | Gibco | 11965 |
| Falcon 50mL | Pack | Falcon | 352070 |
| Intramedic PE Tubing | 0.58 mm | Becton Dickinson and Co. | 427410 |
| Isoflurane | 250 mL | Abbot Animal Health | 52600405 |
| Ketamine | 100 mg/mL | Fort Dodge, Animal Health | N/A |
| Mannose receptor antibody | Biotin | AbD Serotec | MCA2235B |
| Metallic Strainer | Standard kitchen strainer | Target | Laurentiis |
| Paraformaldehyde | 16% | Electron Microsc. Sciences | 15710 |
| Penicillin/ Streptomycin | 100x | Gibco | 15070 |
| Percoll | 1 Liter | GE Healthcare Biosciences | 17 0891 01 |
| RELMα antibody | 50 μg | Peprotech | 500-P214 |
| Surgical Thread | 2.0 USP 100 yds | Surgical Specialties Corp. | SP118 |
| Syringe Needle | 23g, 3/4 inch | BD Vacutainer Lab. Med. | 305143 |
| USA Standard Testing Sieve | 150 μm, 0.0059″ | W.S. Tyler, Inc. | ASTME-11, Spec. No. 100 |
| Xylazine | 20 mg/mL | Butler | N/A |
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