Endotel Keratoplasti için Kornea Donör doku hazırlanması

1. Kurulum: Aseptik Teknik 11 Laminar Flow Hood (LFH) açın. Azot gazı kontrol ünitesi açın. Bu hortum konsol ünitesi ve Azot tank arasında bağlandığından emin olun. Üzerine gaz açın. Gaz ayar regülatörü tank 50-60 PSI olarak ayarlanması gerekir. Ünitede Türbin basıncı 3,3-3,4 Barlar okumalısınız. Test düğmesine basın. Atmosfer basıncı altındaki 200 olmalıdır 700S ve pompalar 1 ve 2 'de okur. Test tamamlandığında ünite bipler. Göz koruma, uygulanabilir ve kapaklı Don maske. Elleri ve don non-steril eldiven yıkayın. Steril alanı oluşturmaya LFH ve açık giydirmeleri içinde steril kitleri yerleştirin. Bir steril tıp bardak ve köklü steril alanın yanındaki steril gazlı bez ile tek steril plastik havzası yerleştirin. Tıp kabına steril izopropil alkol dökün. Ilaç kabına, aşağı ucu alkollü bez / ped ve yeri prob ile pakimetri probu silin. Prob ucu 10 m için izopropil alkol yıkanmalıdırinutes. Pakimetri probu 10 dakika ıslatılır sonra, plastik havzasında alkol ve yer prob kaldırmak için önceden doldurulmuş şırınga ile steril su ile prob ucu durulayın. Aseptik teknik kullanarak, önceden hazırlanmış paket zaten bir parçasıdır sürece steril bölgeye steril öğeleri (bıçak, steril eldiven ve korneal görüntüleme odaları) açın ve bırakın. Korunması medya ve LFH içinde yer (Şekil 2) kornea dokusu elde edilir. Flakon (ler) açın ve uygun bir biohazard yuvasına kapak (lar) atmayın. Non-steril eldiven atın. Steril eldiven giyilmesini. Pakimetre bulunur alanın tarafına önceden paketlenmiş olan plastik bir lavabo yerleştirin. Kaput reentering ve steril alan dokunmaktan kaput dışında hat önlemek için böyle bir şekilde çizgi güvence kaput dışında musluk ve infüzyon hattı yerine başak sonuna infüzyon hattı bağlayın. Kornea doku transferi gerçekleştirin. Nazikçe si, doku ve orta dökünMevcut tüpten steril bir görüş odasına ngle hareket. Endotel tarafı yukarı tutmak için emin olun. Odasının kapağını yerleştirin. Steril alanda doku ve medya içeren odaları tutun. LFH gelen flakon (ler) çıkarın. Çıkarın ve steril eldiven atın. Spike dengeli tuz solüsyonu (BSS) infüzyonu hattı ile şişe. Çalışma alanı yüzeyinden steril BSS yaklaşık dört ayak şişe asın. Steril eldiven ve havlu ile steril elbisesi iki çift açın. Altı dakikalık cerrahi fırçalayın ve kuru elleri gerçekleştirin. Her iki çift steril eldiven, sonra steril önlük giyin. Steril bölgeye alet kutuları ve yer içindekileri açın. Metal lavabo veya ilaç kabına BSS çözümü 10-20 cc dağıtın. BSS solüsyonu ile steril pipet doldurun. Stopcock ve ön kamara infüzyonu portuna infüzyon hattı bağlayın ve küçük bir miktar pistonun üstünde görünecek şekilde BSS ile yıkayın. Üzerine LFH pozisyon suni kamaragazlı bez top. Greft sıkma halkası tersine çevirerek Alt piston. 2. Prosedür Forseps kullanarak hafifçe skleral rim tarafından kornea kavramak. Dikkatle aşağı endotel tarafı pistonun üstüne kornea merkezleme ederken BSS sistemi temizlemek için musluk açın. Baloncuklar kornea altında görünmüyorsa, BSS ile beslerken ve biraz bunları kaldırmak için kornea hareket devam ediyor. Hava kabarcıkları kaldırılır kez infüzyon durdurun. Kornea pistonlu (Şekil 3a) üzerinde ortalanmış olduğundan emin olun. Baz kilitleme halkası üzerinde pozisyon ön kamara kapağını böylece baz açık alanlar haline kapağı uyum sekmeleri söyledi. Kapağı 15 ° saat yönünde çevirerek üssü haline kapağı kilitleyin. Piston yukarı kaldırın ve (Şekil 3b) tamamen sıkın. Steril eldivenli parmak ile, yordamı gerçekleştirmek için yeterli basınç var olmasını sağlamak için korneanın en üst dokunun. Yüzey o on probu yerleştirilerek pakimetri kontrol edinkalınlığı okuma elde etmek f kornea (Şekil 4). Standart sapması 10 daha az olmalıdır. Eğer yoksa, ölçüm geri almak. Pakimetri gerçekleştirmek için kullanılan değildi steril eldivenli eli ile, pakimetri yapılan el türbin hortum geçmek ve kontrol ünitesi içine türbin hortumu vidalayın. Yardımcı teknisyen rekor pakimetri okuma var. Kontamine eldiven çıkarın. Steril bir işaretleme kalemi kullanarak, korneanın merkezi (veya cerrah hiçbir işaretleme tercih ederse işareti yok) doğru limbus bir 4mm çizgi çizin. Kornea üstünde BSS beş damla yerleştirmek için pipet kullanın. Özel talimatlar cerrah tarafından sağlanan sürece önceden kesilmiş pakimetri ölçümü en az 600 mikron ise, 300 mikron kafanın kullanılacaktır. 600 mikron üzerinde, 350 mikron kesici kafa kullanılacaksa. Konu siz ve yukarı bakacak şekilde sayısına doğru bakacak şekilde, mikrokeratom kafasının sağ tarafına doğru bıçak yüklemek ilk sonuna işaret, iletişim wi kaçınarakbıçak th. Her tarafında başı dik, türbin üzerine kafa vidalayın. Yapay odası parmaklarla sıkın. Türbini hortum üzerine türbin vidalayın. 5 saniye süreyle steril su ve nabız türbin kesme kafası daldırarak, bir kez vakum pedalına basarak bıçak salınım test edin. Piston sıkın. 05:00 de montaj sonrası ve konumu ile tabanı üzerine Yeri mikrokeratom. Basın ve bıçak (Şekil 5a) salınacaktır türbin pedalı basılı tutun. Işaret parmağı ve başparmak kullanarak, taban ve türbin üst arasındaki mikrokeratom yarıda tutun. Pürüzsüz, hatta yoluyla ve kornea kesen yapmak bilek çevirin. Yayın türbin pedal ve düz ünitesi kapalı mikrokeratom kaldırın. Vakum (Şekil 5b) kapatmak için vakum pedalına basın. Steril eldiven ve kornea kapağı sonra yeniden kontrol pakimetri okuma Don olmanın ikinci kalınlığı okuma elde etmek için kornea yüzeyinde probu yerleştirilerek kaldırılırdoku çok ince ve kolayca zarar olduğunu dikkatli. Kontamine eldiveni çıkarın. Teknisyeni rekor ikinci pakimetri okuma yardım var. İstenirse steril işaretleme kalemi kullanarak, suni odasında rezidüel stromal yatağın orta periferal kenarında, cerrah tarafından bir işareti koyun. Rezidüel stromal yatağa steril BSS birkaç damla koyun. Mikrokeratom gelen anterior kornea kapağı (Şekil 6) çıkarın ve yapay ön kamara gelen kornea çıkarmadan önce korneanın üzerine değiştirin. Cap doğru varsa kap hizalamak için işaretleme periferik kullanılarak korneanın merkezli olmalıdır. Yavaşça kornea üzerine kapağı yeniden konumlandırmak için sürüntü mızrak kullanın. Ön kapak altında herhangi bir BSS emmek için taze mızrak kullanın. Açık musluk, ters odası açmak ve alt piston deforme gelen kornea önlemek için yeterince yavaş. Taban kilidini ve tabanından yapay odasına fincan itmek BSS akışı baskısı sağlar. Forseps ile yavaşça çekint 9 kornea jant, fincan gevşetmek için 12 ve 03:00 pozisyon. Bir kez gevşetilmiş, kornea kaldırmak için 12 saat pozisyon forseps kullanabilir. Izleme odası, endotel tarafı yukarı (Şekil 7) kornea yerleştirin. Izleme odası kapağı yerleştirin. Steril eldiven çıkarın. Haznesi kapağı incelemekte sıkın. Kesme sonrası biomikroskop değerlendirme ve kornea ve kayıt bulguların speküler mikroskopi gerçekleştirin. Buzdolabının uygun bölümünde yer kamara (lar). Cerrah nakil için Paketi (Şekil 8). 3. Temsilcisi Sonuçlar Pürüzsüz, düzgün lameller kornea donör doku verici kornea sonuçları doğru mekanik mikrokeratom diseksiyonu. Bu kesitte korneanın optik koherens tomografi (OCT) görüntü (Şekil 9) ile gösterilir. Pachymet ile ölçülen nihai posterior kornea dokusu yeterli kalınlıkta olması gerekirry. Michigan Göz Bankası son 6 ay içinde, ortalama işlem öncesi kornea kalınlığı 558 mikron idi ve posterior kornea dokusunun post-processing kalınlığı 158 mikron idi. Seksen yedi 100-200 mikron,% 10.9 ölçülen> 200 mikron ve% 2.1 ölçülen <100 mikron arasında ölçülen mikrokeratom-disseke verici bir doku yüzde. Posterior kornea dokusu nakli alıcıya geliştirilmiş endotel fonksiyonu sağlamak için yüksek endotel hücre yoğunluğu (AKD) muhafaza etmelidir. Speküler mikroskop EÇG ölçmek için kullanılır. Geçtiğimiz 6 ay içinde, Michigan Göz Bankası endotelyal keratoplasti için uygun sayılır kornea dokusunun tüm> 2200 hücre / mm 2 'lik bir EÇG vardı. Önceden kesilmiş DSAEK dokusunun yüzde doksan dokuzu, bir post-processing ECD> 2400 hücre / mm 2 ve% 19 bir EÇG vardı> 3000 hücre / mm 2 vardı. Post-processing ECD öncesi için ortalama değişim% 1.2 (p = 0.0003, eşleştirilmiş iki yönlü t-testi) çok azdı.İşlem sırasında oluşabilecek komplikasyonlar basınç kaybı, asimetrik diseksiyon ve belirgin doku girinti (kornea endotel hücre kaybı ile sonuçlanan) içerir. Yanlış diseksiyonu da doku perforasyona neden olabilir. Şekil 1. 1e için Endotel Keratoplasti Şekil 1a için Kornea Doku Hazırlık Genel Şema verici kornea hazırlık kesit ifadeleridir. 1i için Şekil 1f DSAEK ameliyat sırasında nakli alıcının kornea kesit ifadeleridir. Donör kornea yapay bir ön kamara monte ve mikrokeratom kafası ile disseke edilir. Doku diseksiyonu sonra, iki şeritli ayrıdır ama ön lamel (kap) cerrah ulaşım için kalan kornea yatağa geri konumlandırılmış. Inameliyathanede, cerrah anterior ve posterior hem lamel arasında dikey santral kornea dokusu kesmek için trepan kullanır. Trepan kesme sonra, periferal donör kornea alanı kaldırılır. Posterior lamel yavaşça spatula ile ön lamel kaldırılır. Donör arka lamel (DSAEK doku) alıcı kornea (1i) hastalıklı kısmının yerini alır. Hasta çıkarılabilir bir hastalıklı posterior kornea sahiptir. Hastalıklı posterior kornea büyük çaplı bir daire içinde bir göz içi araç (ters Sinsky kanca) ile atılırsa. Hastalıklı kornea gol sonrası, posterior kornea zarı kaldırılır. Donör arka lamel (DSAEK doku) alıcının gözüne yerleştirilir. Şekil 2. Medya Kornea Doku. Kornea dokusu ha sonra korunması medya olduğunudonörden rvesting. Şekil 3. Yapay Ön Kamara üzerinde Kornea Doku. Kornea dokusu yapay ön kamara önce tabanı kilitleme halkası veya doku diseksiyonu üzerine monte edilir. Kornea dokusu doku üzerinde mühürlenmiş tabanı kilitleme halkası ile yapay ön kamara üzerine monte edilir. Şekil 4. Kornea dokusu kalınlığı kontrol edin. Kornea kalınlığı kornea yüzeyinde ultrason pakimetri probu ile kontrol edilir. Şekil 5. Kornea Doku Diseksiyon. Mikrokeratom bıçak saat beşte montaj sonrası ve konumu ile kaide üzerine yerleştirilir. MikrokeratomDiseksiyon lamelli yapmak için kornea geçirilir. 6 Şekil. Diseksiyon sonra Kornea anterior Cap. Anterior kornea kapağı mikrokeratom diseksiyonu sonrası ücretsiz tamamlandı. Şekil 7. Odası görüntülenen Kornea Dissected. Diseksiyon tamamlandıktan sonra, kornea nakli için görüntüleme odasına döner. Şekil 8. Taşıma Paketleme Kornea. Izleme odasında kornea sonra güvenli cerrah ulaşım için paketlenir. Şekil 9. Kornea OCT Görünüm. Ve EkimNihai disseke kornea (kesitinde) kornea iki yarıya bölündü olduğunu gösterir. Arayüzü oklarla gösterildiği gibi çevre dokulara göre çok daha yoğun yansımasıdır.