Morfometrische analyses van het netvlies secties

Morfometrische analyses van het netvlies onderdelen zijn gebruikt bij de behandeling van retinale aandoeningen. Voor voorbeelden werden neuronale cellen significant verlies in de retinale ganglion cellaag (RGCL) in ratmodellen met N-methyl-D-aspartaat-(NMDA)-geïnduceerde excitotoxiciteit ¹ retinale ischemie-reperfusie ² en glaucoom ^3. Vermindering van INL en innerlijke plexiform laag (IPL) diktes werden teruggedraaid met Citicoline behandeling in ratten de ogen blootgesteld aan kainic zuur-gemedieerde glutamaat excitotoxiciteit ^4. Wijziging van RGC dichtheid en soma maten werden waargenomen met verschillende behandelingen met medicijnen in de ogen met een verhoogde intra-oculaire druk ^3,5,6. Daarom kan met objectieve methoden van het analyseren van de retinale morphometries van grote betekenis zijn bij de evaluatie van retinale aandoeningen en de effectiviteit van therapeutische strategieën.

Het netvlies structuur is multi-lagen en verschillende soorten neuronen Exist in het netvlies. De morfometrische parameters van het netvlies, zoals het aantal cellen, celgrootte en de dikte van de verschillende lagen zijn complexer dan de celcultuur. Vroeg op, kunnen deze parameters worden gedetecteerd met behulp van andere commerciële imaging software. De waarden zijn gewoonlijk van relatieve waarde, en de overgang naar de juiste waarde kan verder nauwkeurige berekening nodig. Ook kan het traceren van de celgrootte en morfologie niet nauwkeurig en gevoelig genoeg statistische analyse van met name de chronische glaucoom model. De metingen die in dit protocol voorzien in een meer nauwkeurige en eenvoudige manier. En de absolute lengte van de lijn en de grootte van de cel direct gemakkelijk worden gekopieerd naar andere bestanden worden gerapporteerd. Zo volgden we de rand van de binnenste en buitenste de meeste kernen in de INL en vormden een lijn dan met behulp van de software om een ​​hoek van 90 graden te vestigen op de dikte te meten. Terwijl zonder de hulp van de software, de lijn misschien schuin en het veranderen van retinale dikte kanniet herhaalbaar zijn bij individuele waarnemers. Bovendien kan het aantal en de dichtheid van RGC worden gekwantificeerd. Dit protocol vermindert met succes de variabiliteit in kwantificeren van kenmerken van het netvlies, verhoogt de gevoeligheid bij het opsporen van minimale veranderingen.

Deze video tonen drie soorten morfometrische analyse van het netvlies secties. Zij omvatten meten INL dikte, dat het aantal RGC en meting van de grootte van RGC in absolute waarde. Deze drie analyses worden uitgevoerd met Stereo Investigator (MBF bio – MicroBrightField, Inc.) De techniek kan bieden een eenvoudige, maar wetenschappelijk platform voor morfometrische analyses.