表征草食动物的耐药机制：Spittlebugs臂形 SPP。为例

1。植物单从成熟的植物扦插作为试点单位。修剪到10厘米的插条，以确保种植材料的统一性。 为了防止植物病原体污染，扦插钠2分钟3％的次氯酸钠溶液洗涤，然后用自来水冲洗thoughroughly。 CA是种植在每个切削。 36克，在一个圆柱形的PVC管（外直径6.5厘米的高度，5.3厘米）的无菌土密封，下端用发泡胶杯和皑皑的PVC套管。切割置于套管中央开放的泡沫环举行。 需要保持土壤墒情充足，植物施肥和浇水。 植物会成长为一个月前被昆虫的挑战，使表层根系的发展，这根木质部喂养spittlebug若虫喂网站服务。 植根于扦插的PVC管倒立8天前为患进一步刺激表层根系的生长，部分调整为根构型的内在的差异。这个步骤需要人工源的光，这是我们提供24公顷的一天。为了避免与草食性草食动物的混杂逃脱，个别工厂复制表层根系很少或根本没有，这反演处理后从实验所淘汰。这消除应是罕见的，从来没有领先，以消除他们所代表的基因型。 2。昆虫成人spittlebugs从外地收集，鉴定到种，并介绍产卵的地方，他们提供的易感brachiariagrasses枝叶喂笼。雌虫在土壤中的鸡蛋放在笼子的底部在一个浅可拆卸托盘中。 几天后，土壤悬浮于水中，并通过一系列的筛子（42，60和150目），收集鸡蛋。暂停在30％的盐溶液的过筛材料，使成熟的卵子浮动，留下未成熟的卵子和任何残留的有机物。 为了防止昆虫病原体污染，蛋是在5分钟钠0.5％次氯酸钠溶液消毒，然后用蒸馏水漂洗。 每个测试厂（试点单位），是出没在土壤表面与6个成熟卵子。只有成熟的卵子孵化选择的侵扰。他们可以识别存在的两个红点在其前部，相应的昆虫的眼睛，粉红色标记，在他们的后部分，相应的昆虫的腹部和一个全面扩大鳃盖。 成功孵化4 d后证实，在这一点任何未孵化的蛋是从我们的殖民地新生儿spittlebug取代。 被安排在一个随机百分之六基因型复制完整的块设计测试工厂。 3。评价这项实验是评价CA。 30 d后为患（确切的时间有所不同，取决于研究的昆虫物种）。 损害是取得了一个可视化规模1至5，其中1对应没有明显可见的损坏，到了山穷水尽的植物（图1）和5对应。评分植物的损害提供了一个宽容的估计。 图1。损害的规模，用于评估spittlebug臂形菌的草食动物的耐受性。 1 =没有检测到损坏; 2 = 0-25％的坏死枝叶; 3 = 25-50％的坏死枝叶; 4 = 50-75％的坏死枝叶; 5 = 75-100％的坏死枝叶。 评估计数达到其最终龄幼虫或成虫期（图2）的昆虫，昆虫的生存。昆虫生存的得分，提供了一种抗菌的估计。 图2。Spittlebug的发展，从第一龄（左）成人（右）。只有达到评价之日起至少他们最终龄（箭头）的昆虫被算作“幸存者”。 4。代表性的成果从有代表性的实验筛选抗spittlebug Aeneolamia reducta 臂形杂交的结果列于图3 。 图3：从筛选抗spittlebug Aeneolamia reducta臂形杂交的结果。我们认为如果他们的反应，以草食动物在此图的下半部分属于植物耐。抗菌增加由右至左和从上到下的耐受性增加。箭头指向耐检查。