والفحص عن عضوي النمط شريحة الوقت الفاصل بين التصوير عالية الدقة للهجرة الخلايا العصبية في الدماغ بعد الولادة
Summary
يصف هذا البروتوكول مقايسة شريحة عضوي النمط الأمثل للدماغ بعد الولادة وعالية الدقة الوقت الفاصل بين التصوير الهجرة neuroblast في تيار الهجرة منقاري.
Abstract
تكوين الخلايا العصبية في الدماغ بعد الولادة يعتمد على المحافظة على ثلاثة أحداث البيولوجي : انتشار الخلايا الاصلية ، والهجرة من neuroblasts ، فضلا عن التفاضل والتكامل من الخلايا العصبية الجديدة في الدوائر العصبية الموجودة. لتكوين الخلايا العصبية بعد الولادة في بصيلات الشم ، يتم فصل هذه الأحداث في غضون ثلاثة مجالات مميزة تشريحيا : يحدث الانتشار إلى حد كبير في المنطقة تحت البطانة العصبية (المنطقة الاقتصادية الخاصة) من البطينين الوحشي ، من خلال ترحيل neuroblasts اجتياز تيار المهاجرة منقاري (RMS) ، وخلايا عصبية جديدة وتميز الاندماج داخل بصيلات الشم (OB). المجالات الثلاثة بمثابة منصات مثالية لدراسة الآليات الخلوية والجزيئية والفيزيولوجية التي تنظم كل من الأحداث البيولوجية واضح. هذه الورقة تصف شريحة مقايسة عضوي النمط الأمثل لأنسجة المخ بعد الولادة ، والتي تحاكي ظروف خارج الخلية عن كثب في البيئة الحية لترحيل neuroblasts. نظهر أن لدينا تجربة يوفر للحركة الموحدة ، المنحى ، والإسراع في neuroblasts RMS. وهذا الاختبار تكون مناسبة للغاية لدراسة تنظيم خلية مستقلة وغير مستقلة للهجرة من خلال استخدام الخلايا العصبية عبر زرع النهج من الفئران لخلفيات وراثية مختلفة.
Protocol
Discussion
الهجرة العصبية في RMS هو عنصر أساسي من تكوين الخلايا العصبية بعد الولادة في بصيلات الشم 1. الهجرة من خلال RMS يحدث في الطائرة عرضية على سطح الدماغ. neuroblasts المهاجرة عرضية مميزة من الخلايا المهاجرة شعاعيا استنادا إلى موقع المصدر السلف الخاصة بهم ، فضلا عن مصير متباين?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
نشكر لرواية دان McWhorter البروتوكول في الفيديو. ويؤيد هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة 5R01NS062182 غرانت ، وهي منحة مقدمة من الاتحاد الأمريكي لبحوث الشيخوخة ، والصناديق المؤسسية التي منحت لHTG.
References
- Ghashghaei, H. T., Lai, C., Anton, E. S. Neuronal migration in the adult brain: are we there yet. Nat. Rev. Neurosci. 8, 141-151 (2007).
- Valiente, M., Marin, O. Neuronal migration mechanisms in development and disease. Curr. Opin. Neurobiol. 20, 68-78 (2010).
- Rakic, P. Evolution of the neocortex: a perspective from developmental biology. Nat. Rev. Neurosci. 10, 724-735 (2009).
- Jaglin, X. H., Chelly, J. Tubulin-related cortical dysgeneses: microtubule dysfunction underlying neuronal migration defects. Trends Genet. 25, 555-566 (2009).
- Carro, M. S. The transcriptional network for mesenchymal transformation of brain tumours. Nature. 463, 318-325 (2010).
- Wu, W. Directional guidance of neuronal migration in the olfactory system by the protein Slit. Nature. 400, 331-336 (1999).
- Hu, H., Tomasiewicz, H., Magnuson, T., Rutishauser, U., U, . The role of polysialic acid in migration of olfactory bulb interneuron precursors in the subventricular zone. Neuron. 16, 735-743 (1996).
- Shapiro, E. M., Gonzalez-Perez, O., Garcia-Verdugo, M. a. n. u. e. l., Alvarez-Buylla, J., &, A., Koretsky, A. P. Magnetic resonance imaging of the migration of neuronal precursors generated in the adult rodent brain. Neuroimage. , (2006).
- Vreys, R. MRI visualization of endogenous neural progenitor cell migration along the RMS in the adult mouse brain: validation of various MPIO labeling strategies. Neuroimage. 49, 2094-2103 (2010).
- Davenne, M., Custody, C., Charneau, P., Lledo, P. M. In vivo imaging of migrating neurons in the mammalian forebrain. Chem. Senses. 30, 115-116 (2005).
- Mirzadeh, Z., Doetsch, F., Sawamoto, K., Wichterle, H., Alvarez-Buylla, A. The subventricular zone en-face: wholemount staining and ependymal. J. Vis. Exp. , (2010).
- Shen, Q. Adult SVZ stem cells lie in a vascular niche: a quantitative analysis of niche cell-cell interactions. Cell Stem Cell. 3, 289-300 (2008).
- Tavazoie, M. A specialized vascular niche for adult neural stem cells. Cell Stem Cell. 3, 279-288 (2008).
- Mirzadeh, Z., Merkle, F. T., Soriano-Navarro, M., Garcia-Verdugo, J. M., Alvarez-Buylla, A. Neural Stem Cells Confer Unique Pinwheel Architecture to the Ventricular Surface in Neurogenic Regions of the Adult Brain. Cell Stem Cell. 3, 265-278 (2008).
- Polleux, F. &. a. m. p. ;. a. m. p., Ghosh, A. The slice overlay assay: a versatile tool to study the influence of extracellular signals on neuronal. Sci. STKE. , L9-L9 (2002).
- Murase, S. &. a. m. p. ;. a. m. p., Horwitz, A. F. Deleted in colorectal carcinoma and differentially expressed integrins mediate the directional migration of neural precursors in the rostral migratory stream. J. Neurosci. 22, 3568-3579 (2002).
- Suzuki, S. O. &. a. m. p. ;. a. m. p., Goldman, J. E. Multiple cell populations in the early postnatal subventricular zone take distinct migratory pathways: a dynamic study of glial and neuronal progenitor migration. J. Neurosci. 23, 4240-4250 (2003).
- Ghashghaei, H. T. The role of neuregulin-ErbB4 interactions on the proliferation and organization of cells in the subventricular zone. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 103, 1930-1935 (2006).
- Khodosevich, K., Seeburg, P. H., Monyer, H. Major signaling pathways in migrating neuroblasts. Front Mol. Neurosci. 2, 7-7 (2009).
- Jacquet, B. V. Analysis of neuronal proliferation, migration and differentiation in the postnatal brain using equine infectious anemia virus-based lentiviral vectors. Gene Ther. 16, 1021-1033 (2009).
