Summary

الفسيولوجية التجريب مع المعى المؤخر جراد البحر : تمرين الطلاب مختبر

Published: January 18, 2011
doi:

Summary

في هذا التقرير أن نبرهن التقنيات التي يمكن استخدامها للتحقيق في علم الأحياء من جراد البحر المعى المؤخر. نعرض كيفية تشريح البطن جراد البحر ودراسة علم التشريح المرتبطة بها ، وعلم وظائف الأعضاء تعديل النشاط. ويتم قياس نشاط تمعجية وقوة تقلصات باستخدام محول القوة.

Abstract

الغرض من التقرير هو وصف تقنيات تشريح لإعداد المعى المؤخر جراد البحر وشرح كيفية جعل التسجيلات الفيزيولوجية مع محول قوة لمراقبة قوة الانكماش. بالإضافة إلى ذلك ، نحن لشرح كيفية مراقبة نشاط تمعجية بصريا ، والتي يمكن استخدامها بوصفها الأحيائي لمختلف الببتيدات والأمينات الاحيائية والعصبية. هذا التحضير هو قابل للطالب في مختبرات الفيزيولوجيا ولما تبديه من المفاهيم الدوائية للطلاب. وقد تم إعداد هذا الاستخدام لأكثر من 100 سنة ، وأنه لا يزال يقدم الكثير كنموذج للتحقيق في توليد وتنظيم الإيقاعات تمعجية واصفا الآليات الكامنة وراء تعديل بهم. والدوائية والمقايسات مستقبلات الفرعية التي كانت بدأت كتابة أكثر من 50 عاما مضت على المعى المؤخر لا تزال تساهم في البحث اليوم. تناسب هذا التحضير قوية لتدريب الطلاب في الفيزيولوجيا وعلم الصيدلة.

Protocol

1. مقدمة وكان الامتثال لمحة عامة شاملة مؤخرا من المعى المؤخر جراد في أطروحة كتبها E. الدكتور Musolf باربرا (2007 ، جامعة ولاية جورجيا ، أتلانتا ، جورجيا ، الولايات المتحدة) ، الذي ركز في المقام الأول على التشكيل هرمون السيروتونين وتعصيب (Musolf وآخرون ، 2009 ). ودرس أولى hindguts القشريات أكثر من 100 عاما من قبل إلكسندروفيتش ، وهو رائد في علم التشريح المقارن (إلكسندروفيتش ، 1909) ، الذي وصف في مختلف جوانب تعصيب بهم. واستمرت البحوث على مدى سنوات ، وتحديد أنواع طبقات العضلات والهيكل ، ومعالجة وظيفة العام للالمعى المؤخر في osmoregulation للحيوان كامل ، وفحص السيطرة modulatory من انقباض المعى المؤخر بواسطة مركبات مختلفة (انظر استعراض Musolf ، 2007). ومن المثير للاهتمام أن نلاحظ أن جزء من الشرج المعى المؤخر الأعمال ليس فقط لطرد البراز ولكن أيضا لتناول المياه من البيئة لosmoregulation. يمكن هذه المنطقة من الأمعاء يخضع إلى الأمام أو عكس التمعج تبعا للاحتياجات الحيوان. حددت إلكسندروفيتش (1909) الضفائر العصبية two التعصيب والمعى المؤخر القشريات ، والضفيرة الداخلي والخارجي الضفيرة ، والتي ثبت لاحقا مصادر غنية لتحديد وتوصيف العصبية. فلوري في عام 1950 بدأ الدكتور ارنست سلسلة من الدراسات الدوائية على المعى المؤخر جراد البحر ويدل على أن انكماش يتم عن طريق التضمين أستيل والمركبات التابعة لها وكذلك الأدرينالين والنورادرينالين (فلوري ، 1954). فلوري ، مكتشف مادة مثبطة المعروف باسم "عامل الأول ،" درس تأثيرات هذه المادة على الاستعدادات المختلفة ، بما في ذلك نظام معهد جوته في جراد البحر (فلوري ، 1961). كنت عامل يظهر لاحقا GABA. وهكذا ، لعبت المعى المؤخر جراد البحر دورا هاما في الدراسات المبكرة من تثبيط متشابك. عقب اكتشاف GABA ، وعرضت أيضا الإرسال المفترضة الأخرى لتكون مرتبطة مع الضفائر المعى المؤخر والحصول على الاستجابات الفسيولوجية. تشمل هذه المحطات الدوبامين (Elekes وآخرون 1988 ؛. Elofsson وآخرون 1968) ، proctolin (RYLPG – OH ؛ مرسييه وآخرون 1997) اثنان الببتيد orcokinin (NFDEIDRSGFGFN وAFDEIDRSGFGFN ؛ Bungart وآخرون 1994 ؛. Dircksen وآخرون 2000) ، orcomyotropin (FDAFTTGFamide ؛ Dircksen وآخرون 2000). الببتيد وmyosuppressin (مرسييه وآخرون 1997 ؛… pQDLDHVFLRFamide الأرجح ، قارن Stemmler وآخرون 2007). كل من هذه المواد ينظم تقلصات المعى المؤخر عفوية ، وكل ما عدا GABA يبدو مثير. والمعى المؤخر يستجيب أيضا لالغلوتامات وquisqualate (جونز ، 1962 ؛ خاطئة وآخرون 2003) ، ولكن لم يبلغ عن أدلة واضحة عن تعصيب glutamatergic تم. هي إلى حد كبير غير مستكشفة رسل الخلايا التي تتوسط آثار مختلف المحطات ، ولكن هناك أدلة على تورط المخيم في قدرة الدوبامين لتعزيز تقلصات (Knotz أند مرسييه ، 1995). على الرغم من أن القشريات المعى المؤخر العقود التالية تلقائيا إزالة التعصيب ، وعادة ما تكون هذه التقلصات ضعيفة وغير منظمة (ويلز ، 1982 ؛ Winlow وLaverack ، 1972a). حركة تمعجية يتطلب تنسيقا الناتج المحرك من النظام العصبي المركزي ، والتي تنشأ على ما يبدو في العقدة في البطن الماضي (Winlow وLaverack ، 1972a ، ب ، ج). في جراد البحر ، ويتم إخراج المحرك إلى المعى المؤخر من خلال الجذر البطن ال 7 ، والذي يحتوي على 75 خلية المحاور التي يتم ترجمة جثث في البطن العقدة الأخيرة (Kondoh وHisada ، 1986). على الأقل بعض من الببتيدات ويبدو أن تزود بها من الضفيرة المعى المؤخر الخلايا العصبية الناشئة في البطن العقدة الأخيرة (Dircksen وآخرون 2000 ؛. مرسييه وآخرون 1991b ؛ Siwicki والمطران ، 1986) ، ولكن يتم توفيره من قبل الخلايا العصبية الدوبامين في أكثر الأمامي العقد (مرسييه وآخرون. 1991a). منذ انتاج السيارات من خلال الجذر البطن ال 7 ضروري لتقلصات كبيرة منسقة ، فمن المرجح أن بعض أو كل من الإرسال المفترضة المذكورة أعلاه تسهم في بعض الطريق لالتمعج. مساهماتها النسبية ، ولكن ، ليست معروفة. قد تكون اكتسبت بعض الضوء من خلال دراسة تأثيرها على عضلات دائرية وطولية بشكل منفصل (مرسييه آند لي ، 2002). بالإضافة إلى السيطرة على حركة المواد الغذائية عسر الهضم ، والضفيرة العصبية المرتبطة المعى المؤخر القشريات ويبدو أن تلعب دورا هاما وظيفة الغدد الصماء المرتبطة طرح الريش. والمعى المؤخر من السرطانات ، وCarcinus maenas ، يحتوي على خلايا الغدد الصماء التي تؤدي إلى إطلاق هرمون القشريات فرط سكر الدم والببتيد في السلائف ذات الصلة خلال انسلاخ (ويبستر وآخرون 2000) ، مما يوحي دورا في امتصاص الماء والتورم المرتبطة طرح الريش. وبالتالي ، فإن المعى المؤخر القشريات تشارك في العديد من العمليات الفيزيولوجية الهامة. هذا التقرير هو في المقام الأول أداة تعليمية لطلاب المدارس الثانوية وطلاب المرحلة الجامعية المتقدمة في علم وظائف الأعضاء الدورات التي تشارك في التجريب. الأهمية ، فضلا عن الآلية المحتملة وراء كيف يمكن معالجة هذه العقود والوظائف المعى المؤخر من قبل الطلاب. وسوف تستخدم وكلاء الدوائية ، العصبية ، وهرمونات عصبية ، وسيتم بناء منحنيات الاستجابة للجرعة ، والتي سوف إشراك الطلاب في كيفية الحصول على وتفسير البيانات الفسيولوجية والدوائية. ويمكن أيضا فهم وظيفة عامة فيما يتعلق مستقبلات ناهضات والخصوم يمكن تحقيقه. سوف يتعلم الطلاب أيضا على تقديم البيانات في شكل رسوم بيانية لتحليل الإحصائي. فمن السهل جدا لتشريح وتسجيل تقلصات المعى المؤخر من جراد البحر. في إعداد تشريح ، يتعرض بسهولة في الأمعاء لمواد خارجية. ويمكن رصد التغيير في النشاط تمعجية بصريا أو مع محول القوة التي تستطيع أن ترصد أيضا قوة الانقباضات. بسبب بساطتها والموثوقية تمهيدا الأحيائي ، والمعى المؤخر جراد البحر ما زالت مفيدة جدا عن التحقيق في العديد من الأسئلة البحثية حول آليات التمعج ، تعديل السيارات من انتاج وتقلص العضلات ، ومستقبلات وظيفة. والمعى المؤخر مفيد أيضا للمبيدات الحشرية الاختبار ، crustaceancides ، والملوثات عن آليات محددة من الإجراءات. 2. طرق 2.1) مواد جراد البحر جراد البحر المالحة أدوات تشريح (مقص الخشنة والدقيقة ، وملقط الخشنة غرامة) Sylgard ذات قاع طبق بتري دبابيس الصلب تشريح الأكواب (لعقد المحاليل الكيميائية) parafilm (لتغطية وخلط المحاليل) 2.2) تشريح ينبغي أن توضع جراد (Procambarus clarkii) قياس 60-10 سم في طول الجسم على الجليد لمدة 5 إلى 10 دقائق لتخدير الحيوانات قبل تشريح يبدأ. عقد جراد تخدير من وراء مخالب بيد واحدة. بسرعة ، وقطع من محجر العين الى منتصف الرأس على كلا الجانبين ، وبقطع ثم جراد (ملاحظة : الدم من إعداد سيتم زجة عندما يجف ، حتى تغسل الأدوات عند اكتماله). الشكل 1 : قطع الرأس من جراد البحر قطع chelipeds والساقين المشي. قطع tailfins اليسار واليمين ، ولم يتبق سوى tailfin المتوسطة (قدم ذنبية). على الجانب الظهري للجراد خفض ventrally على جانب كل من اليسار واليمين من إهاب الظهرية. الشكل 2 : إزالة البشرة الظهرية قطع بالعرض على الجانب الظهري للبشرة ، والتأكد من أن خفض ضحلة لمنع الأضرار التي لحقت GI ثم إزالة الجزء السفلي من البطن إهاب الظهرية. وضع جراد البحر في طبق تشريح Sylgard مبطنة. دبوس جراد البحر إلى طبق في غيض من tailfin. يمكن للمرء أن استخدام المزيد من العلامات على جانبي GI حسب الضرورة لاجراء الجسم باستمرار. ملء طبق جراد البحر مع المياه المالحة التي تغطي GI تأكد من اخماد باستمرار مع GI المالحة باستخدام ماصة. المالحة هو الحل فان تعديل Harreveld في (1936) ، والتي تتم مع كلوريد الصوديوم 205 ملم ؛ بوكل 5.3 مم ؛ 13.5 ملم CaCl 2 2H 2 O ؛ 2.45 ملي MgCl 2 6H 2 O ؛ HEPES 5 مم وتعديلها لدرجة الحموضة 7.4. ينبغي للجراد تشريح تظهر كما هو مبين في الشكل 3. الشكل 3 : جراد البحر مع تشريح الجهاز الهضمي سليما. 2.3) التجارب 2.3.1) تعهدات في هذا الحيوان لها حلول من المجمع ليكون جاهزا واختبارها في نفس درجة حرارة المياه المالحة في الاستحمام. قد على استخدام الحلول الفردية للسيروتونين (100 نانومتر ، 1microM) ، الغلوتامات (1microM) ، والدوبامين (1microM) المحرز في جراد البحر المالحة والمواد انطلاق لفحصها. السماح للجراد تشريح للجلوس في حل جراد البحر لمدة عشر دقائق للسماح لها التكيف مع الصدمة التشريح والتعرض المالحة. ينبغي للتقلصات التمعج البطيء من البداية وحتى يحدث المعى المؤخر. بمجرد أن تبدأ التقلصات ، سجل عدد من الانقباضات التي تحدث في ثلاثين ثانية (لاحظ نوع من الانقباضات التي تحدث : أي نوع التمعج أو تشنجي ، واتجاه من أي موجات تمعجية). الجدول رقم 1 : تعهدات في جراد البحر المالحة عدد تعهدات نوع من تعهدات باستخدام بيpette ، إزالة الملوحة داخل تجويف بطن جراد البحر والمكشوفة ، وتطبيق المالحة التي تحتوي على مادة للفحص مباشرة على المعى المؤخر. مباشرة بعد إضافة الحل ، سجل عدد الانقباضات التي تحدث بعد ثلاثين ثانية ثم لاحظ نوع من الانقباضات التي تحدث (أي تمعجية أو تشنجي). الجدول 2 : تعهدات للتعرض للمركبات اختبار المركب تركيز عدد تعهدات نوع من تعهدات مباشرة بعد تسجيل استجابة لمادة الاختبار ، وشطف مرات عدة مع GI جراد البحر المالحة العادي. السماح للإعداد الوقوف لمدة 5 دقائق ، بينما الشطف عن كل 30 ثانية مع جراد البحر المالحة. باستخدام ماصة ، ضع بعض المالحة التي تحتوي على مركب المقبل للفحص أو تركيز متنوعة من المواد الخاضعة للمشاركة مباشرة في اختبار المعى المؤخر. فمن الأفضل أن تبدأ مع انخفاض التركيز وطريقة عمل واحد لتركيزات أعلى. مباشرة بعد كل إضافة مادة جديدة أو تركيز كل جديد ، سجل عدد من الانقباضات التي تحدث بعد ثلاثين ثانية ثم لاحظ نوع من الانقباضات. 2.3.2) قوات تسجيل انكماش في التحضيرات رفعه الشكل 4 : الإعداد إرفاق محول إلى جراب الجسر. إرفاق جراب جسر إلى 26T PowerLab. إرفاق 26T PowerLab إلى منفذ USB على الكمبيوتر. فتح LabChart7 ، بالنقر على أيقونة labchart7 على سطح المكتب. سوف مربع LabChart مركز الترحيب البوب ​​مفتوحة. إغلاقه. انقر على الإعداد انقر على ضبط القناة. تغيير عدد من القنوات ل1 (أسفل يسار مربع) دفع موافق. في الجانب الأيسر العلوي من المخطط تعيين الدورات في الثانية الواحدة إلى حوالي 2k. تعيين فولت (المحور الصادي) إلى نحو 500 أو 200 فولت. انقر على القناة 1 على يمين المخطط. انقر على مكبر للصوت الإدخال. تأكد من أن الإعدادات : واحد العضوية ، إلى جانب ميلان ، وعكس (المقلوب إشارة إذا لزم الأمر) ، ومكافحة مستعار ، والتحقق. بدء التسجيل لبدء الصحافة. التقط إعداد وقطع الجهاز الهضمي في هذا المنعطف بين الصدر والبطن. ثم قطع بعناية حول الجزء الدبير الذيل. إزالة الجهاز الهضمي من جراد البحر تشريح ووضعها في صحن Sylgard. هناك الأوعية الدموية التي تمتد على طول الجانب الظهري من الجهاز الهضمي. سحب هذا بعناية بعيدا عن الجهاز الهضمي. صب الطازجة جراد البحر المالحة على إعداد. وضع محول القوة في المشبك بالقرب من جراد البحر تشريح. ربط محول القوة في GI جراد كما هو مبين في الشكل 5. الشكل 5 : المعى المؤخر متفرقة من جراد البحر في المياه المالحة التي تعلق على ربط محول للقوة الانتظار حتى يبدأ الجهاز الهضمي في العقد ، ودفع بدء على LabChart7. السماح لتشغيل البرنامج لنحو 20 ثانية. دفع "وقف" ، وإضافة تعليق المسمى "المالحة فقط". ملء الجدول رقم 4. الجدول 4 : تعهدات مع مجمع الفائدة عدد تعهدات السعة من تعهدات (السيارات) إضافة اختبار المركبات المصالح ، ودفع على الفور "بداية" على LabChart7. السماح لتشغيل البرنامج لنحو 20 ثانية. دفع "وقف" وإضافة التعليق مباشرة على ملف التخطيط لما كانت المادة المضافة وتركيزه. ملء الجدول أدناه. الجدول 5 : تعهدات مع مجمع _________ عدد تعهدات السعة من تعهدات (السيارات) شطف إعداد مع جراد البحر المالحة باستخدام ماصة. إضافة مواد أخرى أو تركيزات مختلفة بطريقة مماثلة. دفع على الفور "بداية" على LabChart7. السماح لتشغيل البرنامج لنحو 20 ثانية. دفع "وقف" ، وتضيف تعليق والتسمية مباشرة على ملف المخطط يشير إلى جompound المستعملة وتركيز. 3. تحليل البيانات 2.3.1 من التجربة ، رسم بياني لعدد من تقلصات كل حل (المالحة ، السيروتونين ، الغلوتامات) مقابل الوقت. أي تفسير الاتجاهات. 2.3.2 من التجربة ، رسم بياني لعدد من تقلصات كل حل (المالحة ، السيروتونين ، الغلوتامات) مقابل السعة للتقلصات في بالسيارات. أي تفسير الاتجاهات. 3.1) قياس معدل وقوة تقلصات يمكن لمؤشر معدلات انكماش في قياس الوقت من البداية على أحد انحراف إلى بداية القرن المقبل أو حساب مجموع الانحرافات أكثر من دقيقة أو اثنتين. ثم يمكن أن توضع القيم من حيث تقلصات في الدقيقة الواحدة أو الثانية في اعتمادا على كيفية السريع حدوثها. لمؤشر القوة يمكن أن تستخدم من تقلصات قياس نسبي للمقارنة بين ظروف مختلفة. على الملف المحفوظ يمكن للمرء استخدام علامة "M" والانتقال إلى الأساس. ثم استخدم المؤشر والانتقال إلى ذروة الانحراف والتنبه من القيمة المذكورة في أعلى يمين الشاشة كقيمة الدلتا (الفرق من M إلى الذروة). لاحظ المؤشر يحتاج إلى أن يوضع ثابتة لقياس التغيير. ثم نقل إلى النموذج M الموجة المقبلة من الفائدة وتكرار هذا الاجراء.

Discussion

التفاصيل الواردة في الفيلم والنص يرتبط وصف الخطوات الرئيسية اللازمة لتسجيل النشاط في المعى المؤخر للجراد في الموقع وكذلك في المختبر. هدف واحد من تقريرنا هو زيادة الوعي لإمكانات هذا في إعداد الطالب وتشغيل مختبرات التحقيق التي تعلم المفاهيم الأساسية في علم وظائف الأعضاء وعلم الصيدلة.

ويمكن استخدام هذه الاستعدادات للتحقيق في عدد من الأسئلة التجريبية التي من شأنها أن تؤدي إلى فهم أفضل للوظائف الفسيولوجية للالمعى المؤخر. ولا تزال الآليات الكامنة وراء تنظيم موجات تمعجية وعكس اتجاهها غير معروفة. هي أيضا آليات لزيادة السيطرة على الجهاز الهضمي بأكمله غير مفهومة تماما. مسألة كيفية دمج أعلى مراكز نشاطها مع الإخراج اللاإرادي الذي يتحكم مباشرة في نظام GI يبقى على مساحة مفتوحة من التحقيق (Shuranova وآخرون ، 2006). بالإضافة إلى ذلك ، قدرات osmoregulatory من المعى المؤخر والقشريات وظائف osmoregulation خلال طرح الريش والإجهاد البيئي لم توضح تماما. لا تزال هناك أسئلة كثيرة تنتظر اجابات في هذا الإعداد.

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

بدعم من جامعة كنتاكي ، قسم علم الأحياء ، ومكتب للدراسات الجامعية وكلية الآداب والعلوم.

Materials

  1. Crayfish (Procambarus clarkii). Atchafalaya Biological Supply Co., Raceland, LA., USA.
  2. Standard crayfish saline: Modified from Van Harreveld’s solution (1936). (in mM) 205 NaCl; 5.3 KCl; 13.5 CaCl22H2O; 2.45 MgCl26H2O; 5 HEPES and adjusted to pH 7.4. Serotonin, glutamate and dopamine are made in crayfish saline. All chemicals are obtained from Sigma chemical company (St. Louis, MO).
  3. Dissection tools: Fine #5 tweezers, fine scissors, knife blade holder, #26002-20 insect pins (all obtained from Fine Science Tools (USA), Inc., 373-G Vintage Park Drive, Foster City, CA 94404-1139)
  4. Sylgard-bottomed Petri dish
  5. Beakers (to hold chemical solutions)
  6. Electrical signals are recorded on line to a PowerLab 26T interface to a computer (ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA). We use standard software from ADInstruments named Chart or Scope.
  7. Bridge pod for the force transducer (different Bridge pods are required for different types of force transducers).
  8. MLT0402 (2 grams) force transducer is the research grade as shown in the video. MLT 0210/D (10 mg-25 grams) and the MLT 500/A (0-500g) are the educational grades transducers (ADInstruments).

References

  1. Alexandrowicz, J. S. Zur Kenntnis des sympathischen Nervensystems der Crustaceae. Jena Z. Naturw. 45, 395-444 (1909).
  2. Bungart, D., Dircksen, H., Keller, R. Quantitative determination and distribution of the myotropic neuropeptide orcokinin in the nervous system of astacidean crustaceans. Peptides. 15, 393-400 (1994).
  3. Dircksen, H., Burdzik, S., Sauter, A., Keller, R. Two orcokinins and the novel octapeptide orcomyotropin in the hindgut of the crayfish Orconectes limosus: identified myostimulatory neuropeptides originating totether in neurons of the terminal abdominal ganglion. J. Exp. Biol. 203, 2807-2818 (2000).
  4. Elekes, K., Florey, E., Cahil, M. A., Hoeger, U., Geffard, M., Salanki, J., Rosza, K. Morphology, synaptic connections and neurotransmitters of the efferent neurons of the crayfish hindgut. Neurobiology of Invertebrates. 36, 129-146 (1988).
  5. Elofsson, R., Kauri, T., Nielsen, S. O., Stroemberg, J. O. Catecholamine-containing nerve fibres in the hindgut of the crayfish Astacus astacus L. Experentia. 24, 1159-1160 (1968).
  6. Florey, E. Uber die wirkung von acetylcholin, adrenalin, nor-adrenalin, faktor I und anderen substanzen auf den isolierten enddarm des flusskrebses Cambarus clarkii Girard. Z. Vergl. Physiol. 36, 1-8 (1954).
  7. Florey, E. A new test preparation for bio-assay of Factor I and gamma-aminobutyric acid. J. Physiol. 156, 1-7 (1961).
  8. Jones, H. C. The action of L-glutamic acid and of structurally related compounds on the hind gut of the crayfish. J. Physiol. (London). 164, 295-300 (1962).
  9. Knotz, S., Mercier, A. J. cAMP mediates dopamine-evoked hindgut contractions in the crayfish, Procambarus clarkii. Comp. Biochem. Physiol. 111A, 59-64 (1995).
  10. Kondoh, Y., Hisada, M. Neuroanatomy of the terminal (sixth abdominal) ganglion of the crayfish, Procambarus clarkii. Cell. Tiss. Res. 243, 273-288 (1986).
  11. Mercier, A. J., Lange, A. B., TeBrugge, V., Orchard, I. Evidence for proctolin-like and FMRFamide-like neuropeptides associated with the hindgut of the crayfish, Procambarus clarkii. Can. J. Zool. 75, 1208-1225 (1997).
  12. Mercier, A. J., Lee, J. Differential effects of neuropeptides on circular and longitudinal muscles of the crayfish hindgut. Peptides. 23, 1751-1757 (2002).
  13. Mercier, A. J., Orchard, I., Schmoeckel, A. Catecholaminergic neurons supplying the hindgut of the crayfish, Procambarus clarkii. Can. J. Zool. 69, 2778-2785 (1991).
  14. Mercier, A. J., Orchard, I., TeBrugge, V. FMRFamide-like immunoreactivity in the crayfish nervous system. J. exp. Biol. 156, 519-538 (1991).
  15. Mercier, A. J., Orchard, I., TeBrugge, V., Skerrett, M. Isolation of two FMRFamide-related peptides from crayfish pericardial organs. Peptides. 14, 137-143 (1993).
  16. Musolf, B. E. Serotonergic modulation of the crayfish hindgut: Effects on hindgut contractility and regulation of serotonin on hindgut. Biol Bull. , (2007).
  17. Musolf, B. E., Spitzer, N., Antonsen, B. L., Edwards, D. H. Serotonergic modulation of crayfish hindgut. Biol Bull. 217(1), 50-64 (2009). Biol Bull. 217, 50-64 (2009).
  18. Shuranova, Z. P., Burmistrov, Y. M., Cooper, R. L. A hundred years ago and now: A short essay on the study of the crustacean hindgut. (Vor hundert Jahren und nun: Eine kurze Geschichte von die Forschung des Hinterdarmes der Crustaceen. Crustaceana. 76, 755-670 (2003).
  19. Shuranova, Z. P., Burmistrov, Y. M., Strawn, J. R., Cooper, R. L. Evidence for an Autonomic Nervous System in Decapod Crustaceans. International Journal of Zoological Research. 2 (3), 242-283 (2006).
  20. Siwicki, K. K., Bishop, C. A. Mapping of proctolinlike immunoreactivity in the nervsou systems of lobster and. 243, 435-435 (1986).
  21. Stemmler, E. A., Cashman, C. R., Messinger, D. I., Gardner, N. P., Dickinson, P. S., Christie, A. D. High-mass-resolution direct-tissue MALDI-FTMS reveals broad conservation of three neuropeptides (APSGFLGMRamide, GYRKPPFNGSIFamide and pQDLDHVFLRFamide) across members of seven decapod crustaean infraorders. Peptides. 28, 2104-2115 (2007).
  22. Wales, W., Sandeman, D. C., Atwood, H. L. Control of mouthparts and gut. The Biology of Crustacea. 4, 165-191 (1982).
  23. Webster, S. G., Dircksen, H., Chung, J. S. Endocrine cells in the gut of the shore crab Carcinus maenas immunoreactive to crustacean hyperglycaemic hormone and its precursor-related peptide. J. Exp. Biol. 300, 193-205 (2000).
  24. Winlow, W., Laverack, M. S. The control of hindgut motility in the lobster Homarus gammarus (L.). 1. Analysis of hindgut movements and receptor activity. Mar. Behav. Physiol. 1, 1-28 (1972).
  25. Winlow, W., Laverack, M. S. The control of hindgut motility in the lobster Homarus gammarus (L.). 2. Motor output. Mar. Behav. Physiol. 1, 29-47 (1972).
  26. Winlow, W., Laverack, M. S. The control of hindgut motility in the lobster Homarus gammarus (L.). 3. Structure of the sixth abdominal ganglion (6 A.G.) and associated ablation and microelectrode studies. Mar. Behav. Physiol. 1, 93-121 (1972).
  27. Wrong, A. D., Sammahin, M., Richardson, R., Mercier, A. J. Pharmacological properties of glutamate receptors associated with the crayfish hindgut. J. Comp. Physiol. 189, 371-378 (2003).

Play Video

Cite This Article
Cooper, A. S., Leksrisawat, B., Gilberts, A. B., Mercier, A. J., Cooper, R. L. Physiological Experimentation with the Crayfish Hindgut: A Student Laboratory Exercise. J. Vis. Exp. (47), e2324, doi:10.3791/2324 (2011).

View Video