Колон Ascendens Стент Перитонит (CASP) - стандартизированные модели для полимикробная абдоминального сепсиса
Summary
Колон Ascendens Стент Перитонит (CASP) является весьма стандартизированной модели для полимикробная абдоминального сепсиса у грызунов. В этой статье описывается хирургическая процедура CASP. Модель CASP и его варианты позволяют систематическое исследование различных проблем, связанных с предметом сепсиса.
Abstract
Сепсис остается постоянной проблемой для отделений интенсивной терапии во всем мире. Понимание сложных механизмов сепсиса является предпосылкой для создания новых терапевтических подходов в этой области. Таким образом, животные модели требуются, которые способны точно имитировать человеческие болезни, а также достаточно иметь дело с научными вопросами. Колон Ascendens Стент Перитонит (CASP) является весьма стандартизированной модели для полимикробная абдоминального сепсиса у грызунов. В этой модели небольшое стент хирургически вставляются в восходящей ободочной кишки мышей или крыс приводит к непрерывной утечке кишечных бактерий в брюшную полость. Эта процедура приводит к перитониту, системной бактериемии, орган инфекции кишечника бактерий, и системные, но и местное высвобождение несколько про-и противовоспалительных цитокинов. Летальность CASP можно управлять с помощью диаметр вставлен стент. Вариант этой модели, так называемые CASP с вмешательством (Каспий), повышает возможность удалить септического очага на вторую операцию в соответствии с общими процедурами в клинической практике. CASP это легко можно научиться и высокой воспроизводимостью модель, которая точно имитирует клинического течения абдоминального сепсиса. Это приводит способ учиться на вопросы в нескольких научных областях, например, иммунологии, инфектологии, или хирургического вмешательства.
Protocol
Discussion
CASP является полимикробная модель абдоминального сепсиса, которая отвечает большинству критериев постулируется для ценной моделью сепсиса: CASP могут быть выполнены в мелких животных, очень воспроизводимые, легко контролировать по стандартным параметрам, обеспечивает хорошую зачитал возможности, и точно имитирует клиническую настройки абдоминального сепсиса. В сравнительном исследовании мы могли бы показать, что приводит к CASP разлитого перитонита с ранней и неуклонно растет системной инфекции и воспаления (синдром системного воспалительного ответа), тогда как слепой кишки перевязки и пункции (CLP) показывает модель внутрибрюшного абсцесса с устойчивым и незначительных признаков системного воспаления (1). Техника Каспий представляет возможность имитировать клинического течения перитонита с последовательным хирургического санитарии фокус, который является наиболее важным терапевтическим принципом у людей. CASP может быть применен для всех вопросов вокруг сепсис или перитонит и поэтому полезен для всех дисциплин дело с сепсисом исследований, например, иммунологии, фармакологии, хирургии, интенсивной терапии и т.д. подборку публикаций по различным предметам сепсиса использованием CASP модель приводится ниже (1-14).
При запуске с CASP, следует иметь в виду, что некоторые практики необходимо, чтобы выполнить операцию точно и быстро. Хирургический опыт может быть полезным, но не требуется. Мы рекомендуем обнаружения letality в качестве параметра для правильного выполнения CASP. Надо начать с 14G CASP как большой стент легче, чем более тонкой. Обученный хирург CASP может работать одна мышь в течение 10 минут. Перед началом любых экспериментов, вы должны убедиться, что вы находитесь рядом с этого периода. Когда вы получили некоторый опыт работы с хирургической процедуры, вы должны проводить выживания кинетической и проверить свои навыки. 14G CASP должны привести к 100% летальности. Новичков в нашей лаборатории, чтобы доказать, что они способны генерировать 100% летальности с 14G CASP, прежде чем начать с экспериментов. Кроме того, бактериологии и цитокинов измерения должны быть выполнены, чтобы проверить сепсиса. Если у вас есть проблемы, начиная с микрохирургической шаги CASP, использование лупы или операционного микроскопа может быть полезным. Но в принципе, CASP может быть также выполнена без этих утилит. Для воспроизводства наши цены на выживание, это абсолютно необходимо, чтобы те же самые материалы, особенно стентов (BD Venflon, см. ниже), которые используются. В противном случае существенного изменения результатов возможно. Кроме того, мы предполагаем, что могут быть изменения в зависимости от результатов, например, индивидуальность хирурга. Тем не менее, влияние таких факторов, как, что должно быть мало.
Таким образом, CASP является практически возможно, простой, воспроизводимой и ценные сепсис модель, которая имитирует тесно клинической ситуации абдоминального сепсиса. Именно поэтому подходит для всех областей сепсис исследований.
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Авторы выражают благодарность Нико Zantl, Клаус Пфеффер, и Бернхард Holzmann. Это исследование было поддержано Deutsche Forschungsgemeinschaft, Бонне-Бад Годесберг, Германия (ГРК-840; Vo 450/10-1).
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Narcotic fluid | Mix 0.5 mL Rompun with 4.0 mL Ketanest, and add 5.5 mL of saline solution (0.9%). For complete anesthesia, inject intraperitoneally 10 μL/g body weight | |||
| Rompun (20 mg/ml Xylazine) | Bayer AG 51368 Leverkusen, Germany | |||
| Ketanest (25mg/ml Esketamine) | Pfizer Pharma GmbH, 10785 Berlin, Germany | 647028001E | ||
| BD Venflon 18GA (1,2x45mm, 80ml/min) | BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ USA 07417 | 391457 | ||
| BD Venflon 16GA (1,7x45mm, 180ml/min) | BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ USA 07417 | 391455 | ||
| BD Venflon 14GA (2,0x45mm, 270ml/min) | BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ USA 07417 | 391456 | ||
| Catgut Polyester 4/0 white, non absorbable | Catgut GmbH, 08258 Markneukirchen, Germany | 17218113 | ||
| Mariderm black 7/0, non absorbable | Catgut GmbH, 08258 Markneukirchen, Germany | 18104900 |
References
- Maier, S., Traeger, T., Entleutner, M., Westerholt, A., Kleist, B., Huser, N., Holzmann, B., Stier, A., Pfeffer, K., Heidecke, C. D. Cecal ligation and puncture versus colon ascendens stent peritonitis: two distinct animal models for polymicrobial sepsis. Shock. 21, 505-511 (2004).
- Bougaki, M., Searles, R. J., Kida, K., Yu, J. D. e., Buys, E. S., Ichinose, F. NOS3 protects against systemic inflammation and myocardial dysfunction in murine polymicrobial sepsis. Shock. , (2009).
- Buras, J. A., Holzmann, B., Sitkovsky, M. Animal models of sepsis: setting the stage. Nat Rev Drug Discov. 4, 854-865 (2005).
- Busse, M., Traeger, T., Potschke, C., Billing, A., Dummer, A., Friebe, E., Kiank, C., Grunwald, U., Jack, R. S., Schutt, C., Heidecke, C. D., Maier, S., Broker, B. M. Detrimental role for CD4+ T lymphocytes in murine diffuse peritonitis due to inhibition of local bacterial elimination. Gut. 57, 188-195 (2008).
- Daubeuf, B., Mathison, J., Spiller, S., Hugues, S., Herren, S., Ferlin, W., Kosco-Vilbois, M., Wagner, H., Kirschning, C. J., Ulevitch, R., Elson, G. TLR4/MD-2 monoclonal antibody therapy affords protection in experimental models of septic shock. J Immunol. 179, 6107-6114 (2007).
- Entleutner, M., Traeger, T., Westerholt, A., Holzmann, B., Stier, A., Pfeffer, K., Maier, S., Heidecke, C. D. Impact of interleukin-12, oxidative burst, and iNOS on the survival of murine fecal peritonitis. Int J Colorectal Dis. 21, 64-70 (2006).
- Kerschen, E. J., Fernandez, J. A., Cooley, B. C., Yang, X. V., Sood, R., Mosnier, L. O., Castellino, F. J., Mackman, N., Griffin, J. H., Weiler, H. Endotoxemia and sepsis mortality reduction by non-anticoagulant activated protein. C. J Exp Med. 204, 2439-2448 (2007).
- Kiank, C., Koerner, P., Kessler, W., Traeger, T., Maier, S., Heidecke, C. D., Schuett, C. Seasonal variations in inflammatory responses to sepsis and stress in mice. Crit Care Med. 35, 2352-2358 (2007).
- Lustig, M. K., Bac, V. H., Pavlovic, D., Maier, S., Grundling, M., Grisk, O., Wendt, M., Heidecke, C. D., Lehmann, C. Colon ascendens stent peritonitis–a model of sepsis adopted to the rat: physiological, microcirculatory and laboratory changes. Shock. 28, 59-64 (2007).
- Traeger, T., Kessler, W., Assfalg, V., Cziupka, K., Koerner, P., Dassow, C., Breitbach, K., Mikulcak, M., Steinmetz, I., Pfeffer, K., Heidecke, C. D., Maier, S. Detrimental role of CC chemokine receptor 4 in murine polymicrobial sepsis. Infect Immun. 76, 5285-5293 (2008).
- Traeger, T., Kessler, W., Hilpert, A., Mikulcak, M., Entleutner, M., Koerner, P., Westerholt, A., Cziupka, K., Rooijen, N. v. a. n., Heidecke, C. D., Maier, S. Selective depletion of alveolar macrophages in polymicrobial sepsis increases lung injury, bacterial load and mortality but does not affect cytokine release. Respiration. 77, 203-213 (2009).
- Traeger, T., Mikulcak, M., Eipel, C., Abshagen, K., Diedrich, S., Heidecke, C. D., Maier, S., Vollmar, B. Kupffer cell depletion reduces hepatic inflammation and apoptosis but decreases survival in abdominal sepsis. Eur J Gastroenterol Hepatol. , (2010).
- Weighardt, H., Kaiser-Moore, S., Schlautkotter, S., Rossmann-Bloeck, T., Schleicher, U., Bogdan, C., Holzmann, B. Type I IFN modulates host defense and late hyperinflammation in septic peritonitis. J Immunol. 177, 5623-5630 (2006).
- Zantl, N., Uebe, A., Neumann, B., Wagner, H., Siewert, J. R., Holzmann, B., Heidecke, C. D., Pfeffer, K. Essential role of gamma interferon in survival of colon ascendens stent peritonitis, a novel murine model of abdominal sepsis. Infect Immun. 66, 2300-2309 (1998).
