Denne videoen gir en detaljert metodikk for å vokse brystkreftceller i en 3D kjellermembranproteinmatrise, som eksemplifiserer potensialet til 3D-kultur i vurderingen av celleinvasjon i omgivelsene.
Protocol
1. Tredimensjonal kultur av brystkreftceller i kjellermembranmatrisen (innebyggingsteknikken) Håndtering av Matrigel kjellermembranmatrise: Tine på is over natten ved 4 °C. Kjellermembranmatrise er flytende ved lav temperatur, men størkner ved romtemperatur. Oppbevar membranmatrisen i kjelleren på is (Figur 1A-B). Dekk den konfokale no.1 glassbunnsfatet med 50 μl kjellermembranmatrise ved å spre matrisen ved hjelp av spissen av en P-200 Pipetman i et spiralmø…
Representative Results
Figur 1. Tredimensjonal kultur av MDA-MB-231 brystkreftceller i kjellermembranmatrise (innebyggingsteknikken). A-B) Et skjematisk av det eksperimentelle oppsettet (utført i avtrekkshetten). C) Brønnen på den glassbunnede retten belagt med 50 μl kjellermembranmatrise. D) Tallerken(er) plassert i en cellekulturinkubator (ved 37 °C med 5 % CO2) for å la matrisen størkne i minst 30 min. E) Celler ble prøvet. F) Celler…
3D Culture Basement Membrane Assay: Culturing Cancer Cells on 3D Basement Membrane Protein Matrix to Study Cell Invasion. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20220, doi: (2023).