Bu videoda transgenik zebra balığı embriyolarının perivitelline alanına meme kanseri hücre nakli için bir mikroenjeksiyon yöntemi açıklanmaktadır. İnkübasyondan sonra, kanser hücre invazyonunu, yayılmasını ve metastazı gözlemlemek için embriyoyu floresan bir mikroskop altında görselleştiririz.
Protocol
1. Metastatik Süreci Görüntüle ve Analiz Et Geniş uçlu pastör pipet ile birkaç uyuşturulmuş embriyo toplayın ve bunları bir polistiren kabının cam tabanına aktarın. Fazla suyu çıkarın ve sınırlı miktarda yumurta suyu tutun. Embriyoyu bir saç halkası aracıyla pozisyona getirin ve camın üzerine bir kapak yerleştirin. Suya daldırma veya uzun mesafeli kuru hedefler ile birlikte ters konfokal mikroskop kullanın. Embriyoyu, ilgi alanı hedefe mümkün…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
Wide-tip Pasteur pipette (0.5-20 µL)
Eppendorf
F276456I
Confocal microscope
Leica
SP5 STED
Stereo microscope
Leica
MZ16FA
Tg (fli:EGFP) zebrafish strain
Kindly provided by Dr. Ewa SnaarJagalska (Institute of Biology, Leiden University, Leiden, The Netherlands)
zPDX-Analysis of Invasiveness: Investigating Invasive Behavior of Metastatic Cancer Cells in Zebrafish Embryo Xenografts. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20219, doi: (2023).