إعداد عينة المجهر ورقة خفيفة: تصاعد الأجنة حمار وحشي الحية للتصوير على المدى الطويل
Published: April 30, 2023
Abstract
المصدر: Icha J., وآخرون. باستخدام المجهر فلورسينس ورقة خفيفة لصورة زيبرافيش العين التنمية. ج. فيس إكسب. (2016).
توضح هذه المقالة إعداد عينة للفحص المجهري الفلوري ذو الورقة الخفيفة. كما أنه يوضح طريقة لتركيب أجنة حمار وحشي حية للتصوير على المدى الطويل ، مما يسمح بتسجيل الأفلام الطويلة الفاصلة زمنيا للأجنة الحية في ظروف شبه فسيولوجية.
Protocol
1. إعداد العينة إعداد مزيج الآغاروز 15 دقيقة قبل صنع مزيج agarose، تذوب واحدة 1 مل aliquot من 1٪ نقطة انصهار منخفضة agarose (المذاب في E3 المتوسطة) في كتلة التدفئة تعيين إلى 70 درجة مئوية. بمجرد أن يتم منصهرة تماما agarose، نقل 600 ميكرولتر في أنبوب 1.5 مل جديدة، إضافة 250 ميكروغرام من E3 المتوسطة…
Materials
| Lightsheet Z.1 microscope | Carl Zeiss Microscopy | ||
| Low melting point agarose | Roth | 6351.1 | |
| Low melting point agarose | Sigma | A4018 or A9414 | |
| Ethyl 3-aminobenzoate methanesulfonate (MESAB/ MS-222/Tricaine) | Sigma | E10521 | |
| 20 μl (1 mm inner diameter, marked black) capilllaries | Brand | 701904 | sold as spare part for transferpettor |
| Teflon tip plungers for 20 μl capillarie | Brand | 701932 | sold as spare part for transferpettor |
Cite This Article
Light Sheet Microscopy Sample Preparation: Mounting Live Zebrafish Embryos for Long-Term Imaging. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20185, doi: (2023).