Оптогенетика позволяет использовать свет для манипулирования нейронами, которые генетически модифицированы, чтобы выразить специфические опсины-светочувствительные белки, активация света которых вызывает изменение состояния нейрона. Здесь мы описываем оптогенетический подход в Drosophila с помощью opsin Channelrhodopsin2. В примере протокола содержится анализ оптогенетики, установленный для изучения нейрональной схемы, которая стоит за поведением мухи.
Protocol
Этот протокол является выдержкой из де Врис и Clandinin, Оптигенетическая стимуляция побега Поведение в Drosophila меланогастер, J. Vis. Exp. (2013). 1. Создать Channelrhodopsin мух Кросс UAS-ChR2 летает с водителем Gal4 по вашему выбору, мы используем G105-Gal4, который выражается в нейронах …
Representative Results
Рисунок 1: Экспериментальная настройка, показывающая платформу с вертикальным держателем и четырьмя холодными шлангами, держащими тепловые раковины со светодиодными массивами, прикрепленными к ним. (A)Настройка под окруж?…
Materials
Reagent
All-trans Retinal
Advance Scientific Chemical Inc
R3041
Equipment
Heat Sink 9.2 C/W
Luxeonstar
LPD30-30B
30 mm square X 30 mm high
Carclo 18° Tri-Lens
Luxeonstar
10507
Blue Rebel LED on Tri-Star Base
Luxeonstar
MR-B0030-20T
470 nm, 174 lm @ 700 mA.
700 mA BuckPuck DC Driver
Luxeonstar
3021-D-E-700
Wiring Harness for BuckPuck Driver
Luxeonstar
3021-HE
Pre-cut thermal adhesive tape
Luxeonstar
LXT-S-12
20 mm Hex Base
Snap-Loc Coolant Hose, ¼" ID
McMaster-Carr
5307K49
Snap-Loc Coolant Hose Connector
McMaster-Carr
5307K39
¼" NPT Male
Laboratory Grade Switching Mode Programmable DC Power Supply