Etanol Fiksasyonu ve DAPI Boyama: C. elegans'ta DNA'yı Görselleştirmek için Bir Yöntem
Published: April 30, 2023
Abstract
Kaynak: Clarke, E. K., vd. Caenorhabditis elegansPloidy manipülasyonu. J. Vis. Exp. (2018).
Burada, genomik DNA’yı sabit, bozulmamış nematodlarda görselleştirmek için kullanılan bir tekniği tarif ediyoruz. Video, döllenmemiş C. elegans oositlerindeki kromatinleri saymak için örnek bir protokol içerir.
Protocol
Bu protokol Clarke ve ark . Tetraploid suşları, kısırlaştırılmamış oositlerindeki kromozom sayısı sayılarak doğrulanabilir. Floresan mikroskopi, suşun kromozomlar için floresan bir işaretleyicisi varsa, döllenmemiş diploid oositlerdeki (meiotik bölünmelerden önce) kromozom çiftlerinin sayısını taramak için kullanılabilir. Floresan kromozom beli…
Materials
| Dissecting Microscope | Motic Microscopy | SMZ171 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Staining | |||
| Hoechst 33258, Pentahydrate | Biotium | 40045 | |
| DAPI | Biotium | 40011 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Ethanol Fixation | |||
| Ethanol, Pure, 190 Proof (95%), USP | Koptec, VWR | 89125-166 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| M9 Buffer | |||
| Sodium chloride, Biotechnology Grade | VWR | 97061-278 | |
| Potassium phosphate, Monobasic Anhydrous Grade | VWR | 97062-346 | |
| Sodium phosphate, monobasic dihydrate | Fisher Scientific | AC271750025 |
Cite This Article
Ethanol Fixation and DAPI Staining: A Method to Visualize DNA in C. elegans. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20136, doi: (2023).