Dissociação de células únicas de caenorhabditis elegans: Um método para isolar células vivas
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Alemanha, E.M., et al. Isolamento de populações específicas de neurônios de Lombriga Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (2019).
Este vídeo descreve um método para dissociar vermes inteiros em uma suspensão unicelular adequada para FACS ou imunoprecipitação de células intactas.
Protocol
Este protocolo é um trecho da Alemanha et al, Isolamento de Populações específicas de neurônios da Lombriga Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2019). 1. Preparação e coleta de vermes envelhecidos para isolamento celular NOTA: Explicado abaixo está o isolamento de neurôn…
Materials
| Agar, Molecular Biology Grade | VWR | A0930 | |
| CaCl2 | Sigma | C5670 | |
| Contess Automated Cell Counter | Invitrogen | Z359629 | |
| DTT | USBiological | D8070 | |
| FBS | Omega Scientific | FB-02 | |
| Fluorodeoxyuridine | Sigma | F0503 | |
| HEPES | Sigma | H3375 | |
| KCl | Amresco | O395 | |
| KH2PO4 | USBiological | P5110 | |
| Leibovitz's L-15 Medium | Gibco | 21083027 | |
| MgCl2 | Sigma | M8266 | |
| MgSO4 | USBiological | M2090 | |
| Na2HPO4·7H2O | USBiological | S5199 | |
| NaCl | VWR | X190 | |
| NaOCl (Bleach) | Clorox | ||
| Penicillin-Streptomicen | Fisher Scientific | 15140122 | |
| Pronase E | Sigma | 7433 | protease mixture from Streptomyces griseus |
| SDS | Amresco | O227 | |
| SMT1-FLQC fluorescence stereomicroscope | Tritech Research | ||
| Sucrose | USBiological | S8010 |
Cite This Article
Single Cell Dissociation of Caenorhabditis elegans: A Method to Isolate Live Cells. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20135, doi: (2023).