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用于研究拉帕霉素/mTOR相互作用的半定量药物亲和反应目标稳定性 （DARTS） 测定
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A Semi-Quantitative Drug Affinity Responsive Target Stability (DARTS) assay for studying Rapamycin/mTOR interaction
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用于研究拉帕霉素/mTOR相互作用的半定量药物亲和反应目标稳定性 （DARTS） 测定

DOI:
10.3791/59656-v

•

00:05 min

•

August 27, 2019

•

, , , ,
1Department of Orthopaedic Surgery,New York University Medical Center, 2Department of Cell Biology,New York University School of Medicine

章

  • 00:04標題
  • 00:47Collect and Lyse Cells
  • 01:59Incubate Protein Lysates with the Small Molecule and Perform Proteolysis
  • 03:28Western Blot Analysis
  • 03:59Results: Rapamycin Inhibition
  • 05:03Conclusion

概要

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在这项研究中，我们通过监测蛋白质稳定性的变化和估计蛋白质-配体相互作用的亲和力，增强了DARTS实验的数据分析能力。相互作用可以绘制成两条曲线：蛋白质解解曲线和剂量依赖曲线。我们使用 mTOR-拉帕霉素相互作用作为示例案例。

タグ

DARTSDrug Affinity Responsive Target StabilityMTORRapamycinProtein-ligand InteractionProteolytic CurveDose-dependence Curve293T CellsCell LysisBCA AssayPronaseProtease Inhibitor CocktailSDS-PAGE

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