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Ein Oligonukleotid-basierte Tandem RNA Isolierung Vorgehensweise eukaryotischen mRNA-Protein-komplexe
JoVE Journal
生化学
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JoVE Journal 生化学
An Oligonucleotide-based Tandem RNA Isolation Procedure to Recover Eukaryotic mRNA-Protein Complexes

Ein Oligonukleotid-basierte Tandem RNA Isolierung Vorgehensweise eukaryotischen mRNA-Protein-komplexe

DOI:

09:45 min

August 18, 2018

  • 00:04標題
  • 00:32Antisense Oligonucleotide (ASO) Design
  • 02:22Protein Extract Preparation
  • 04:08Step 1: Poly(A) RNA Isolation
  • 05:45Step 2: Specific mRNA Capture with 3 -Biotinylated 2 -Methoxy Modified Antisense RNA Oligonucleotides
  • 07:41Results: Capture of Specific mRNA-protein Complexes from Extracts Derived from UV Crosslinked Cells with TRIP
  • 09:00Conclusion

概要

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Ein Tandem RNA Isolierung (Reise) für die Verwertung von endogen gebildeten mRNA-Protein-komplexe Vorgehensweise wird. Speziell, RNA-Protein-komplexe sind vernetzt in VivoPolyadenylated RNAs sind isoliert aus Extrakten mit oligo(dT) Perlen und besonderen mRNAs werden mit modifizierten RNA antisense Oligonukleotide erfasst. Proteine gebunden, mRNAs werden vom Immunoblot Analyse erkannt.

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