Spinal cord injury models should be highly reproducible. We demonstrate that the calibrated forceps compression model of spinal cord injury is an easy to use surgical method for generating reproducible injuries to the murine spinal cord.
Kemirgen omurilik yaralanmaları Sıkıştırma omurilik yaralanması (SKY) ve spinal rejeneratif tedavinin çalışma için değerli hayvan modelleri vardır. sıkıştırma yaralanma kalibre forseps modeli SCI için uygun, düşük maliyetli ve çok tekrarlanabilir hayvan modeli. Bu Plemel ve arkadaşları tarafından yayınlanmış yönteme uygun olarak tadil edilmiş bir çift forseps kullanılır. (2008) yanal olarak 0.35 mm'lik bir mesafeye omurilik sıkıştırmak. Bu videoda, biz modifiye forseps ile omurilik bası ardından omuriliği, maruz dorsal laminektomi gösterecektir. Videoda, biz de felçli laboratuvar hayvanlarının bakımı ile ilgili konuları ele alacak. Bu yaralanma modeli hissi bozukluğu, yanı sıra engelli bacak hareket fonksiyonunu sergileyen fareler üretiyor. Imünohistokimyasal yöntemlerle belirlenebilir Bundan başka, yaralanma, bu yöntem olup, omurilik yaralanması patolojisinde tutarlı sapmaları üretir. Bu vid izledikten sonraeo, izleyiciler yaralanma sonrası bozukluğunu azaltmak için tasarlanmış SCI ve / veya tedaviler üzerinde çalışmalar için fare çeşitli ağırlıktaki SCI üretmek için gerekli malzemeleri ve yöntemleri belirlemek gerekir.
SCI hayvan modelleri omurilik travma sonucunda hasar azaltmak için tasarlanmış tedavi paradigmalar etkinliğini değerlendirmek için değerli araçlardır. Deneysel zorunluluk dışında, bu modeller, lokomotor ve duyusal davranışları tekrarlanabilir açıklarını sağlamak şiddetini farklı yaralanmaları üretmek için ayarlanabilir ve bu yaralanma şiddeti nörolojik hasar derecesi ile ilişkilidir göstermek zorundadır. Transeksiyon, kontüzyon, ve sıkıştırma 1: farklı yaralanma özellikleri ile SCI üç ana tipi vardır. Kısaca, bir transeksiyon yaralanması, omurilik bir yırtık olan bir Kontüzyon yaralanmasının sırt omurilik uygulanan kısa bir odak kuvvet ortaya çıkar, ve kompresyon hasarı zedelenmesi, omurilik kuvvet tatbik edildiği zaman meydana gelir ve aynı zamanda olabilir ezilme yaralanması 2 olarak anılacaktır.
Tam transeksiyonu yaralanmaları kontüzyon bir süre, insanlarda 3 klinik olarak nadirdird sıkıştırma yaralanmalar daha sık görülür. sıkıştırma yaralanma örneğin, tümör sıkıştırma ya da diğer zararlı basınç kuvvetleri için, neden insan SCI bulunan ne benzer bir sonuç üretir ve araçları basit bir dizi kullanılarak yapılabilir. Kontüzyon ve sıkıştırma yaralanmalar bir sıkıştırma kuvveti olan ve her ikisi de bu sitoarkitektonik düzensizlik benzer patolojik özelliklere sahip olması ile benzerdir ve yaralanma 1,4 benzer endojen yanıtı ortaya. çürük hasarı içeren model, genellikle, omuriliğin 2,5,6 bir çarpma kaynaklanan SCI insan durumlarda benzer bir şekilde, özel bir aparat kullanılarak sırt omuriliğe bu kuvvet uygular. Bunun tersine, basınç yaralanmaları dorsal ya da yanal kuvvet uygulanarak çeşitli yöntemler ile üretilebilir. Bir sıkıştırma yaralanma Yöntemleri forseps 7, anevrizma klipleri 2 kalibre, veya omurilik 8 üzerine doğrudan bir ağırlık yerleştirerek içerir. Bir avantajıAnevrizma klipleri onlar kuvvet 9 farklı miktarlarda sağlamak mümkün olmasıdır. omurilik doğrudan 8 dorsal yüzeyine ağırlıkları ekleme yöntemi büyük ölçüde nedeniyle solunumu nedeniyle ağırlık ve hareket yerleştirme ameliyat süresini artırarak ve tutarsızlıklar sonuçlanan, 10 dakika boyunca yerde olması ağırlık gerektirir hayvan. Bu gibi kontüzyon yaralanmalarının için Kırıcılar olarak farelerde kullanılmak üzere tasarlanmış özel tertibatlarda hayvanlar yerleştirilmesi farelerin küçük boyutu, zor olabilir veya tutarsız yaralanma 7 neden olur. Ancak, fareler SCI araştırma için yararlı olan bu tür sıçan veya tavşan gibi daha büyük hayvanlarda farklı olarak, transjenik soyların geniş bir yelpazesi mevcuttur.
Omuriliği sıkıştırmak için kalibre forseps kullanarak Plemel yöntemi yaralanma şiddeti ve nörolojik defisit 7 arasındaki korelasyon yüksek derecede bir tekrarlanabilir SCI oluşturur. Bu cerrahi SCI modeliya da metal epoksi ya da tamamen kapanmasını önlemek için başka bir engel nedeniyle belirli bir mesafe ile birbirinden uzağa yapılacak modifiye No 5 Dumont forseps bir çift ile oluşturulan. Bu mühendislik boşluk sağlar ki olacak her zaman birden fazla ameliyatlarda belirli bir genişliğe yakın ve farklı kullanıcılar tarafından forseps. Plemel yöntemin avantajı kalibre forseps üretmek için malzemeler kolaylıkla satın alınır ve özel ekipman gerek kalmadan laboratuarda monte edilebilir olmasıdır. Bu forseps otoklav ve sterilizasyon birden tur dayanabilir, ve ayrı, hantal cihazın eksikliği ameliyatları düzenler.
Bu videoda bir sıkıştırma yaralanma oluşturmak için fare omurilik kalibre forseps bir çift cerrahi kullanımını göstermektedir. Biz de post-operatif yaşam kalitesini artırmak ve mortaliteyi azaltmak için omurilik yaralı laboratuvar hayvanlarının bakımı ile ilgili benzersiz endişeleri gidermek.
Bir SCI modelinin seçimi SCI insan vakalarının tedavilerinin etkinliğini belirlemek için deney tasarlama önemlidir. Bu tür deneyler sonuçsuz verileri neden olabilir değişkenliği sınırlamak için yüksek tekrarlanabilir bir hayvan modeli gerektirir. Onlar da doğru onlar modelleme insan durumunu değerlendirmek için klinik önemi olmalıdır. Bu amaçla, bir transeksiyonu üzerinde bir sıkıştırma ya da çürük hasarı seçme daha klinik 3 ile ilgilidir. Bununla birlikte, kontüzyon yaralanmalarının için Kırıcılar ve ağırlık damla cihazları pahalı ve karmaşık makinelerin kullanımını gerektirir. Buna karşılık, SCI kalibre forseps model ortak laboratuar malzemelerinden montajı kolay olan forseps modifiye faydalanan ve cerrahi omuriliği ortaya çıkarmak için bir standart dorsal laminektomi sonrası yalnızca bir ek adım gerektirir. Ancak, bu yöntemi kullanarak bir dezavantajı basınç kuvveti her zaman olduğu gibi, yanal yerine dorsal daha uygulanır olmasıdırEn sık yöntem kontüzyon modelleri 1,2 den dokusunun büyük bir rostral-kaudal ölçüde etkileyecek kullanılarak oluşturulan SCI 9 ve basınç yaralanmaların insan klinik durumlarda görülür. Bu model, teknik düzenleyicileri tarafından ortaya konmuştur, ve bize, yeniden üretilebilir SCI 7,11 oluşturmak için, ve farelerde boyutu için de çok uygundur. Hayvanlar hayvanların bir kohort aynı yaralanma şiddetini paylaşan doğrulamak için böyle Locomotion için Basso Fare Ölçeği ve Frey saç testi gibi davranış testleri, çok sayıda kullanılarak ameliyat ve tedavi tedavilerden sonra değerlendirilecek için Ayrıca, bu yaralanma modeli veriyor ve nörolojik defisit 7,11-13. Bu teknikleri, aynı zamanda omurilik yaralanması 2,7 tedavilerin değerlendirmek için kullanılan hayvan modelleri için genel kriterleri karşılayan, araştırma çalışmalarında hayvanlara tatbik tedavilerin etkisini değerlendirmek için kullanılabilir.
kalibre forcep üretmek için bir yöntemYaralanma modeli için basit ve farklı çeşitli yöntemler ile gerçekleştirilebilir. Biz Plemel 7 tarafından yayınlanan, boşluk yöntemi 11 kullandık, ve aynı zamanda sıkıştırma aygıtı oluşturmak için kolay bir yöntem sağlar sadece küçük bir vida kullanarak forseps değiştirilmiş, ancak aynı zamanda, son sıkıştırma genişliğini ayarlayarak çok yönlülük sağlar karşılaştırmalı çalışmalar için fayda. forseps yaratma seçenekleri yelpazesi çok uzun boşluk (ler) her zaman aynı mesafeye forseps kapanış istikrarlı yolunu sağlamak ve otoklav ve sterilizasyonu dayanabilir neredeyse sınırsızdır. Bu videoda anlatılan cerrahi yöntemler ancak laminektomi performans ve omurilik artırabilir herhangi bir ek sıkıştırma kuvvetleri zarar vermez, böylece işlem yapıldıktan sonra hayvan dikilmesi sırasında dikkat edilmesi gereklidir, kullanıcılar arasında oldukça tekrarlanabilir yaralanma şiddeti ve gelecek deneyler bulandırabilir. </p>
Uygun eğitim ve uygulama ile, sıkıştırma yaralanma kalibre forseps modeli insanlarda 2,3,7 gözlenen klinik vakalar taklit farelerde omurilik gerçekleştirmek için uygundur. Nedeniyle yaralanma şiddeti, farklı derecelerde fareler, forseps oluşturma üretme kolaylığı kolayca yapılabilir. Bu transgenik farelerde şiddeti farklı derecelerde SCI genetik etkilerin gözlenmesine ve farelerde kök hücre nakli etkinliğini değerlendirmek için büyük bir fayda sağlayacaktır. literatürdeki çalışmaların çoğunluğu nedeniyle genellikle gerçekleştirmek için ameliyatlar kolaylaştırır boylarına için fareler üzerinde yapılmıştır. Ancak bu video Plemel ark. 7 tarafından yayınlanan ve bizim tarafımızdan açıklanan yöntem büyük kolaylık ve tekrarlanabilirlik ile fareler üzerinde gerçekleştirilecek SCI imkan vermelidir.
The authors have nothing to disclose.
Funding for this work was provided by Shriners Hospitals and CIRM fellowships to AMC and AM. We would also like to acknowledge Plemel et al.7 for first designing and publishing the calibrated forceps model.
Name | Company | Catalog No. |
Isoflurane Machine | Smiths Medical PM, Inc | VCT302 |
Isoflurane | Phoenix Pharmaceutical | NDC: 66794-013-25 |
Dissecting Scope | Seiler Precision Microscopes | SSI 202/402 |
Germinator-500 (tool sterilizer) | Thomas Scientific | 3885A20 |
Puralube (Eye Ointment) | Dechra | NDC 17033-211-38 |
Scalpel Handle (#3) | Fine Science Tools | 10003-12 |
Scalpel Blade (#11) | Fisher Scientific | 08-914B |
Retractor (Colibri ) | Fine Science Tools | 17000-03 |
Friedman Pearson Roungeur | Fine Science Tools | 16021-14 |
Vanna (Castroviejo) Scissors | Roboz | RS-5658 |
Tissue Forceps | Fine Science Tools | 11029-14 |
Laminectomy Forceps (Dumont #2) | Fine Science Tools | 11223-20 |
Dumont #5 Forceps | Fine Science Tools | 11252-20 |
Stapler | Fine Science Tools | 12031-07 |
Staples (wound clips) | Reflex7 | 203-1000 |
Sutures | Henry Schein | 101-2636 |
Needles (30 G x ½) | BD Biomedical | 305106 |
Syringe (1 ml) | BD Biomedical | 309659 |
Baytril (enrofloxacin) | Bayer | NADA 140-913 |
Buprenex (buprenorphine) | Cardinal Health | NDC 12496-0757-1 |