Questa comunicazione presenta i dati sulla precisione e la riproducibilità dei Biospec nano-UV-VIS per dsDNA e quantificazione delle proteine. Anche con ultra-piccoli volumi (da 1 a 2 L), la riproducibilità è eccellente, mentre la funzione automatica pulire migliora la velocità e si traduce in riporto minimo per ottenere risultati più precisi.
Nucleic Acid procedure di quantificazione sono avanzati in modo significativo negli ultimi tre decenni. Sempre più, i biologi molecolari richiedono costante di piccoli volumi analisi dei campioni di acidi nucleici per i loro esperimenti. Il Biospec-nano fornisce una possibile soluzione ai problemi della inesatte, non riproducibili, inerenti gli attuali metodi di quantificazione del DNA, attraverso l'ottica specializzati e un rivelatore sensibile PDA. Il Biospec-nano dispone anche di funzionalità automatizzate in modo tale che il montaggio, la misura e la pulizia sono fatte dallo strumento, eliminando così il posizionamento noioso, ripetitivo, e incoerente l'elemento in fibra ottica e la pulizia manuale.
In questo studio, i dati vengono presentati sulla quantificazione di DNA e proteine, nonché la riproducibilità di misura e precisione. Contatto automatizzata dei campioni e la scansione rapida consente di misurare in tre secondi, con conseguente rendimento eccellente. L'analisi dei dati viene effettuata utilizzando il built-in caratteristiche del software. La formula utilizzata per calcolare la concentrazione del DNA è:
Concentrazione campione = DF · (OD260-OD320) · NACF (1)
Dove DF = fattore di diluizione del campione, NACF = fattore di concentrazione di acido nucleico.
Il fattore di concentrazione di acido nucleico è impostato secondo l'analita selezionato 1.
Risultati concentrazione di proteine può essere espressa come mg / ml o come moli / L inserendo E280 e valori di peso molecolare rispettivamente. Quando i valori di residui di Tyr, Trp e cisteina (SS obbligazioni) sono inseriti nella scheda e280Calc, i valori di estinzione coefficienti sono calcolati come E280 = 5500 x (residui Trp) + 1.490 x (residui Tyr) + 125 x (cisteina SS bond) . L'E280 valore viene utilizzato dal software per il calcolo della concentrazione.
Oltre alla determinazione della concentrazione di acidi nucleici e proteine, il Biospec-nano può essere usato come un ultra-micro volumi spettrofotometro per molti altri analiti o come uno spettrofotometro standard con 5 celle cammino ottico mm.
Il Biospec-nano è stato progettato per risolvere i problemi attuali inerenti i metodi di quantificazione del DNA, come i risultati inconsistenti e lavoro manuale noioso. Ogni misurazione dura solo 3 secondi, consentendo un esperto biologo molecolare per l'analisi circa 3-6 campioni multipli in un minuto. La caratteristica unica del tergicristallo non solo migliora il throughput di misura, elimina anche la necessità di pulizia manuale dei piedistalli, con conseguente riporto trascurabile tra le misurazioni. Inoltre, i test utilizzando solo 2 salviette per i campioni di DNA contenente 1000 ng / mL, indicato riporto inferiore a 2 ng / mL.
La disponibilità di una cella di 5 millimetri Lunghezza di percorso fornisce un'opzione per analizzare diluire campioni di acidi nucleici e proteine ed estende l'uso di questo strumento per altre applicazioni.
The authors have nothing to disclose.
Material Name | タイプ | Company | Catalogue Number | Comment |
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BioSpec-nano | Shimadzu | |||
Calf Thymus DNA | Sigma Aldrich | |||
Bovine Serum Albumin | Sigma Aldrich |