Cette communication présente des données sur la précision et la reproductibilité des BioSpec nano-UV-VIS spectrophotomètre pour ADNdb et la quantification des protéines. Même avec ultra-petits volumes (1 à 2 L), la reproductibilité est excellente, tandis que la fonction automatisée essuyant améliore le débit et les résultats de report minimale pour obtenir des résultats plus précis.
Nucleic Acid procédures de quantification ont considérablement progressé au cours des trois dernières décennies. De plus en plus, des biologistes moléculaires nécessitent cohérente petit volume d'analyse d'échantillons d'acides nucléiques pour leurs expériences. Les nano-BioSpec fournit une solution potentielle aux problèmes de la inexactes, les résultats non reproductibles, inhérente à la quantification méthodes actuelles de l'ADN, via l'optique spécialisée et un détecteur sensible PDA. Le BioSpec-nano a aussi des fonctionnalités automatisées telles que le montage, la mesure et de nettoyage sont effectuées par l'instrument, éliminant ainsi le placement fastidieuse, répétitive et incohérente de l'élément de fibre optique et le nettoyage manuel.
Dans cette étude, les données sont présentées sur la quantification de l'ADN et de protéines, ainsi que sur la reproductibilité et la précision de mesure. Contact avec l'échantillon automatisée et balayage rapide permet de mesurer en trois secondes, résultant en un débit excellent. L'analyse des données est effectué en utilisant les fonctionnalités intégrées dans le logiciel. La formule utilisée pour calculer la concentration en ADN est la suivante:
Concentration de l'échantillon = DF · (OD260-OD320) · NACF (1)
Où DF = facteur de dilution de l'échantillon et NACF = facteur de concentration d'acide nucléiques.
Le facteur de concentration d'acide nucléique est fixé en conformité avec l'analyte sélectionné 1.
Résultats de concentration en protéines peut être exprimée en pg / mL ou en moles / L en entrant e280 et les valeurs de poids moléculaire respectivement. Lorsque les valeurs des résidus pour Tyr, Trp et la cystéine (SS obligataires) sont entrés dans l'onglet e280Calc, les valeurs du coefficient d'extinction sont calculés comme e280 = 5500 x (résidus Trp) + 1490 x (résidus Tyr) + 125 x (cystéine SS obligataire) . La valeur E280 est utilisé par le logiciel pour le calcul de la concentration.
En plus de détermination de la concentration des acides nucléiques et les protéines, les nano-BioSpec peut être utilisé comme un ultra micro-volume spectrophotomètre pour beaucoup d'autres analytes ou comme un spectrophotomètre standard utilisant des cellules 5 mm trajet optique.
Les nano-BioSpec a été conçu pour résoudre les problèmes actuels inhérents aux méthodes de quantification de l'ADN, telles que des résultats incohérents et le travail manuel fastidieux. Chaque mesure ne prend que 3 secondes, permettant à un biologiste expérimenté moléculaire pour analyser plusieurs échantillons d'environ 3-6 en une minute. La fonction d'essuie-glace unique, non seulement améliore le débit de la mesure, il élimine également le besoin pour le nettoyage manuel des piédestaux, résultant en report négligeables entre les mesures. Par ailleurs, des tests en utilisant seulement 2 lingettes pour les échantillons d'ADN contenant 1000 ng / uL, a indiqué report moins de 2 ng / mL.
La disponibilité d'une cellule de 5 mm trajet optique fournit une option pour analyser diluer l'acide nucléique et des protéines des échantillons et s'étend à l'utilisation de cet instrument pour d'autres applications.
The authors have nothing to disclose.
Material Name | タイプ | Company | Catalogue Number | Comment |
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BioSpec-nano | Shimadzu | |||
Calf Thymus DNA | Sigma Aldrich | |||
Bovine Serum Albumin | Sigma Aldrich |