我々は、実証<em> in vivoで</em網膜神経節細胞(RGCs)と幅広い年齢層にわたって出生後のマウスでは他の網膜の細胞型の単一または小さなクラスターをトランスフェクトするための>エレクトロポレーションプロトコル。ラベルを付けたり、遺伝的に生後RGCsを操作する機能<em> in vivoで</em>発達研究のための強力なツールです。
最近、エレクトロポレーションは、網膜5月11日に荷電分子を送達するための正確な空間的、時間的な制御を提供するための効果的な方法となっています。現在の網膜エレクトロポレーションプロトコルは、遺伝子操作が可能で、出生後のマウスのRGCsの単一または少数のクラスタのretinofugal予測のトレースをしないでください。それは 、in vivo エレクトロポレーションで生後は標識効率が極めて低いためRGCsをトランスフェクションするための実行可能な方法ではない、したがって、RGC前駆細胞の分化と増殖6を受けている胚の年齢でターゲティングが必要と主張されています。
Ruthazer, E. S., Haas, K., Javaherian, A., Jensen, K., Sin, W. C., Cline, H. T., Yuste, R., Konnerth, A. In vivo time- lapse imaging of neuronal development.Imaging in Neuroscience and Development: A Laboratory Manual. , 191-204 .
Kachi, S., Oshima, Y., Esumi, N., Kachi, M., Rogers, B., Zack, D. J., Campochiaro, P. A. Nonviral ocular gene transfer.Gene Ther. 12, 843-851 (2005).
Dhande, O. S., Crair, M. C. Transfection of Mouse Retinal Ganglion Cells by in vivo Electroporation. J. Vis. Exp. (50), e2678, doi:10.3791/2678 (2011).