Bu video, Drosophila locomotion’ı incelemek için kullanılan bir davranış yöntemi olan ada testini açıklar. Örnek protokol, yarı otomatik görüntü analizi ile uyumlu test için bir kurulum içerir.
Protocol
Bu protokol, Drosophila Adası Tahlilinde Locomotor Davranışının Yüksek Verimli Analizi, J. Vis. Exp. (2017) Eidhof ve ark.’danbir alıntıdır. 1. Ada Tahlil Kutusunun İnşası Bir su tabakası(yani banyo) içerecek şekilde poli metil methakrilat (PMMA) gibi sağlam bir malzemeden yapılmış bir tepsi hazırlayın. Malzemenin beyaz olmadığından emin olun.NOT: 40 x 35 x 2,5 cm3 boyutları öne…
Representative Results
Şekil 1: Ada testinin gerekliliklerini, deneysel prosedürünü ve analizini özetleyen akış çizelgesi. (A) Ada tahlil ekipmanları. (B) Ada tahlil için deneysel kurulum. (C) Ada tahlil. (D) Ada tahlil verilerinin”Drosophila Adası Tahlil” makrosu ile işlenmesi. “Drosophila Island Assay” makrosu 3 alt makrodan oluşur: 1) yığın …
Materials
25 x 95 mm Drosophila vials
Flystuff
32-116SB
–
Logitech C525 HD Webcam
Logitech
–
Any webcam with USB connection is suitable.
Stand to hold webcam
–
–
–
Lamp
–
–
12 V LED lights are appropriate
Pounding pad
–
–
Any mouse pad works
Island Assay box
–
–
Dimensions 40x35x2.5 cm. Hole 20×30 cm. Transparent.
Fiji/ImageJ plugin that can be used on Mac alternative to HandyAvi for image-recordings and can be downloaded from: https://imagej.nih.gov/ij/plugins/webcam-capture/ When using this method, the user has to use the same folder setup and image-recording settings indicated in this manuscript, with the exception that for each experimental replicate, the captured image stack should be exported as Stack.tiff to the corresponding experimental replicate folder. Upon running the "Drosophila Island Assay" macro on this data, no text should be present in the "First frame identifier" setting.