Rivista
/
Biochimica
/
Måling af nukleotidbinding til intakte, funktionelle membranproteiner i realtid
JoVE Journal
Biochimica
This content is Free Access.
JoVE Journal Biochimica
Measuring Nucleotide Binding to Intact, Functional Membrane Proteins in Real Time

Måling af nukleotidbinding til intakte, funktionelle membranproteiner i realtid

DOI:
10.3791/61401-v

•

08:33 min

•

March 11, 2021

•

, ,
1Department of Physiology, Anatomy and Genetics,University of Oxford, 2Department of Chemistry and Neuroscience Program,Trinity College

Capitoli

  • 00:04Introduction
  • 00:36Unroofed Membrane Experiments
  • 04:36Patch-Clamp Fluorometry Experiment
  • 05:56Results: Representative Measurement of Nucleotide Binding to Intact, Functional Membrane Proteins in Real Time
  • 07:55Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Traduzione automatica

Denne protokol præsenterer en metode til måling af adeninnukleotidbinding til receptorer i realtid i et cellulært miljø. Binding måles som Förster-resonansenergioverførsel (FRET) mellem trinitrophenylnukleotidderivater og protein mærket med en ikke-kanonisk, fluorescerende aminosyre.

Tags

Nucleotide BindingMembrane ProteinsFRETATPPotassium ChannelDiabetesUnroofed MembraneSonicationMicroscopyANAPFluorescence Imaging

Article

Embed

AGGIUNGI ALLA PLAYLIST

Usage Statistics

Video correlati

Brug Stillads Liposomer at Rekonstituer Lipid-proksimal protein-protein interaktioner<em> In vitro</em

Metode til at visualisere og analysere membran interagerende proteiner af Transmission Electron Microscopy

Måling af G-proteinkoblet receptorreceptor via radio-mærket GTP-binding

Måling af proteinbinding til F-actin ved co-sedimentering

Måling af Biomolekylær DSC profiler med termolabile ligander til hurtigt karakterisere foldning og bindende interaktioner

Antistatiske Microgravimetry at studere bindende dynamikken i Phospholipid bindende Protein Annexin A2 til fast-understøttet Lipid dobbeltlag ved hjælp af et Quartz Resonator

Opsamling og identifikation af RNA-bindende proteiner ved hjælp af klik kemi-assisteret RNA-interactome Capture (CARIC) strategi

Fluorescerende sølv farvning af proteinerne i polyacrylamidgeler

Overvågning af GPCR-β-arrestin1/2 interaktioner i realtid levende systemer til at fremskynde Drug Discovery

PeptiQuick, et et-trins inkorporering af membran proteiner i Biotinylerede Peptiskiver for strømlinede protein bindende assays

Read Article