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Messung der Nukleotidbindung an intakte, funktionelle Membranproteine in Echtzeit
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Measuring Nucleotide Binding to Intact, Functional Membrane Proteins in Real Time
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Messung der Nukleotidbindung an intakte, funktionelle Membranproteine in Echtzeit

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•

08:33 min

•

March 11, 2021

DOI:

10.3791/61401-v

DOI:
10.3791/61401-v

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08:33 min
March 11, 2021

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1Department of Physiology, Anatomy and Genetics,University of Oxford, 2Department of Chemistry and Neuroscience Program,Trinity College

Summary

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Dieses Protokoll stellt eine Methode zur Messung der Adenin-Nukleotid-Bindung an Rezeptoren in Echtzeit in einer zellulären Umgebung vor. Die Bindung wird als Förster-Resonanzenergietransfer (FRET) zwischen Trinitrophenylnukleotidderivaten und Proteinen, die mit einer nicht-kanonischen, fluoreszierenden Aminosäure markiert sind, gemessen.

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Nucleotide BindingMembrane ProteinsFRETATPPotassium ChannelDiabetesUnroofed MembraneSonicationMicroscopyANAPFluorescence Imaging

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Usher, S. G., Ashcroft, F. M., Puljung, M. C. Measuring Nucleotide Binding to Intact, Functional Membrane Proteins in Real Time. J. Vis. Exp. (169), e61401, doi:10.3791/61401 (2021).

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