Rivista
/
/
Biotin-basierte Pulldown Assay, Validate mRNA Ziele der zellulären miRNAs
JoVE Journal
Genetica
È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo.  Accedi o inizia la tua prova gratuita.
JoVE Journal Genetica
Biotin-based Pulldown Assay to Validate mRNA Targets of Cellular miRNAs
DOI:

11:00 min

June 12, 2018

, , ,

Capitoli

  • 00:04Titolo
  • 01:34Preparation of Streptavidin Coated Magnetic Beads — I
  • 03:52Preparation of Cell Lysate
  • 05:36Preparation of Streptavidin Magnetic Beads — II
  • 06:34Pull-down of Target mRNA-miRNA Complexes
  • 07:35Total RNA Extracted, cDNA Synthesis, and qPCR
  • 08:57Results: Use of MicroRNAs to Capture the Target mRNA
  • 09:55Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Dieser Bericht beschreibt eine schnelle und zuverlässige Methode zur Validierung von mRNA Ziele der zellulären MiRNAs. Die Methode verwendet, die synthetische biotinylierte gesperrt Nukleinsäure LNA-basierte MiRNA imitiert erfassen gezielt mRNA. Anschließend Streptavidin beschichteten magnetische Beads werden eingesetzt, um Pulldown das Ziel mRNA zur Quantifizierung von qPCR-Polymerase-Kettenreaktion.

Video correlati

Read Article