È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
Capitoli
- 00:04Titolo
- 01:34Preparation of Streptavidin Coated Magnetic Beads — I
- 03:52Preparation of Cell Lysate
- 05:36Preparation of Streptavidin Magnetic Beads — II
- 06:34Pull-down of Target mRNA-miRNA Complexes
- 07:35Total RNA Extracted, cDNA Synthesis, and qPCR
- 08:57Results: Use of MicroRNAs to Capture the Target mRNA
- 09:55Conclusion
Dit verslag wordt een snelle en betrouwbare methode voor het valideren van mRNA doelstellingen van cellulaire miRNAs beschreven. Het gebruik van de methode synthetische biotinyleerd vergrendeld nucleïnezuur LNA gebaseerde miRNA bootst te vangen target mRNA. Vervolgens daar beklede magnetische kralen pulldown worden gebruikt de doelstelling mRNA voor kwantificering van qPCR polymerase-kettingreactie.
